二十二碳六烯酸对裸鼠结肠癌移植瘤基因表达谱影响研究-肿瘤学专业论文.docxVIP

二十二碳六烯酸对裸鼠结肠癌移植瘤基因表达谱影响研究 中文摘要 二十二碳六烯酸对裸鼠结肠癌移植瘤基因表达谱影响研究 中文摘要 背景：已有的研究表明，二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid, DHA)对于前列腺 癌、乳腺癌、结直肠癌等多种肿瘤的发生、发展具有抑制作用。结肠癌是常见的恶性 肿瘤，动物实验和体外细胞培养实验证实 DHA 对结肠癌和结肠癌细胞具有抑制或杀 伤作用，但具体机制尚不明确。 目的：应用新型分子生物学手段，全面阐明 DHA 在抑制结肠癌发生发展中的分 子机制，并为 DHA 新型抗癌药物的应用提供理论基础。 方法：裸鼠皮下植入人结肠癌 HCT-15 细胞，建立人结肠癌裸鼠动物模型，分别 喂养含 DHA 的饲料和正常饲料。8 周后，观察 DHA 对裸鼠结肠癌移植瘤生长的影响； 采用人表达谱芯片方法比较喂食含 DHA 的饲料和正常饲料的裸鼠结肠癌移植瘤基因 表达谱的差异，采用生物信息学方法差异表达的基因功能以及涉及的信号通路；挑选 部 分 差 异 表 达 基 因 ， 应 用 半 定 量 逆 转 录 酶 聚 合 酶 链 反 应 (reverse transcriptase polymerase chain reaction, RT-PCR)方法，在裸鼠动物模型和细胞水平上验证上述表达 谱芯片结果。 结果：1）与喂养正常饲料的人结肠癌裸鼠相比，喂养含有 DHA 饲料的裸鼠结 肠癌移植瘤瘤块体积明显降低，通过体内实验印证了 DHA 抑制肿瘤生长的作用；2） 表达谱芯片检测共筛选得到 2073 个差异表达基因（以差异 2 倍以上为标准确定差异 表达基因）。与对照组相比，喂食含 DHA 的饲料的瘤体中 967 个基因表达上调，1106 个基因表达下调；其中表达差异较大的基因包括是基质 Gla 蛋白（matrix Gla protein）、 免疫球蛋白 κ（immunoglobulin kappa）相关蛋白、转录起始因子 TFIID 相关蛋白 （Transcription initiation factor TFIID subunit 11）等基因；3）生物信息学表明上调表 达的基因主要影响分子结合、酶分子结合、底物特异性转运、细胞骨架蛋白等；下调 表达的基因涉及转运活性、受体结合、跨膜转运活性、底物特异性转运活性、结构分 子活性、底物特异性跨膜转运活性、离子跨膜转运活性、同种蛋白结合、蛋白二聚化 活性、钙离子结合、序列特异性 DNA 结合等。4）选取部分差异基因进行逆转录酶 聚合酶链反应，结果表明，在裸鼠移植瘤水平和体外细胞水平，喂养含 DHA 饲料或 添加 DHA 均 导 致 环 氧 合 酶 2(cyclooxygenase 2, COX2) 、 低 氧 诱 导 因 子 二十二碳六烯酸对裸鼠结肠癌移植瘤基因表达谱影响研究 中文摘要 -1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α) 、 血 管 内 皮 细 胞 生 长 因 子 -A(vascular endothelial growth factor -A, VEGF-A)、软骨寡聚基质蛋白(cartilage oligomeric matrix protein, COMP)、基质金属蛋白酶-1(matrix metalloproteinases-1, MMP-1)、基质金属蛋 白酶-9(matrix metalloproteinases-9, MMP-9)、固醇携带蛋白 2(sterol sarlier protein 2, SCP2)、多配体蛋白聚糖 3(syndecan 3, SDC3)等基因表达水平等下调，表明 DHA 可通 过多个上述基因相关通路抑制结肠癌细胞生长。 结论：DHA 能显著抑制裸鼠结肠癌移植瘤的生长。DHA 可通过抑制血管新生、 基质金属蛋白酶等多方面的分子生物学机制抑制结肠癌的发生发展。 关键词：二十二碳六烯酸（DHA）；结肠癌；基因表达谱；表达谱芯片，逆转录 酶聚合酶链反应 作 者:孟 优 指导老师:陶 敏 二十二碳六烯酸对裸鼠结肠癌移植瘤基因表达谱影响研究 英文摘要 Effects of docosahexaenoic acid on gene expression profiles of colorectal transplanted tumors in mude mice ABSTRACT Background The inhibiting effects of docosahexaenoic acid (DHA) on the t