禽流感免疫胶体金快速检测技术研究mrax8hlc.pptVIP

Ab1、Ab2最佳工作浓度的选择的确定  用已知AIV标准抗原和阴性抗原进行了方阵滴定（3次重复），结果分析表明，选择Ab1浓度为1.25 μg/ml、Ab2稀释度为1:32000为最佳工作浓度。 灵敏度试验 以不同浓度AIV 标准抗原，做灵敏度试验，以OD450值为纵坐标，抗原浓度为横坐，制备标准曲线如图，线性检测范围在7.5ng/ml-500ng/ml，其线性良好，最低检测下限为3.75ng/ml。 对不同稀释浓度的AIV标准抗原进行检测，重复检测16次，浓度在7.5ng/ml-500ng/ml的结果为阳性。在7.5ng/ml与3.75ng/ml之间设7ng/ml、6.5ng/ml、6.0ng/ml、5.5ng/ml、 5ng/ml、 4.5ng/ml、4.0ng/ml几个浓度度，再次进行检测，当抗原浓度为5ug/ml时检测线反应结果较明现，抗原浓度为4.5ng/ml时反应结果不明显。初步判定AIV免疫胶体金层析法检测的灵敏度为5ng/ml。 7 6.5 6.0 5.5 5 4.5 4.0 3.75 阴性 AIV免疫