酵母菌的酒精发酵整理版.pptVIP

* * （二）Glu 生物合成途径及调节机制 1. 合成途径 （2）以乙酸作为碳源 （1）以糖质原料（最后水解为Glc）作为碳源 谷氨酸的大量积累不是由于生物合成途径的特异，而是菌体代谢调节控制和细胞膜通透性的特异调节以及发酵条件的适合。 * 由 生物合成 的代谢途径 Glc Glu DCA循环 TCA循环 乳酸 * DCA循环 TCA循环 以乙酸为唯一碳源生物合成 的代谢途径 Glu * 注意： （1）产物为L-型 （2）需要引入NH4+（但要适量），产物一般以谷氨酸铵盐的形式存在：C5H8O4N?NH4 * 谷氨酸生产菌：棒状杆菌属、短杆菌属、小杆菌属及节 杆菌属中的细菌。 2. 谷氨酸生产菌 ▲谷氨酸生产菌有以下共同特征： （1）都是需氧型微生物； （2）都是生物素缺陷型； （3）发酵中菌体发生明显的变化，同时发生细胞膜 渗透性的变化； （4）CO2固定反应酶系活力强； （5）α-酮戊二酸脱氢酶活力缺失或微弱； * （6）柠檬酸合成酶、顺乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶 以及Glu脱氢酶活力强； （7）能利用醋酸； （8）具有向环境中泄漏Glu的能力； （9）不分解利用Glu，并能耐高浓度的Glu； （10）Glu对Glu脱氢酶存在着反馈抑制和反馈阻遏。 因此，前述两种生物合成Glu的途径应为： * 因为Glc抑制异柠檬酸裂解酶的活性，故异柠檬酸的分解反应微弱。 乳酸 * DCA循环 * 3. 有关Glu代谢途径的解释 （1） 以Glc为碳源的代谢途径 ① 许多研究证明：以Glc为C源时，糖酵解经EMP和 HMP两个途径进行，但是以EMP为主（占74%）。 ② 当TCA循环有缺陷时，DCA循环起补充四碳二羧酸 的作用。 * C4二羧酸：草酰乙酸、苹果酸、延胡索酸、琥珀酸。 ③ 如果C4二羧酸完全由CO2固定反应提供： * DCA循环 乳酸 * 此时，Glu对Glc的理论收率为81.7% 总反应式为： C6H12O6 + NH3 + 3/2 O2 C5H9O4N + CO2 + 3 H2O ④ 在Glu生成期，若CO2固定反应完全不起作用，C4二 羧酸完全由DCA循环提供： * 延胡索酸 琥珀酸 乳酸 * 反应如下： 此时，Glu对Glc的理论收率仅为54.4% ∴在Glu生成期，最好没有异柠檬酸裂解反应，应关闭 DCA循环。 * 在菌体生成期，可走DCA循环。 实际收率处于中间值（54.4%~81.7%）。CO2固定反应与DCA循环的比率对Glu的产率有影响，后者的活性越高，Glu的生成收率越低。 * 所以， 由Glc生成Glu的理想途径为： 四碳二羧酸完全由CO2固定化反应提供。 * （2） 以乙酸为碳源的代谢途径 DCA循环是四碳二羧酸的唯一来源。 （3） 两种途径中，细胞内α-酮戊二酸与异柠檬酸的量 需维持平衡。 反馈抑制 * 4. 由Glc生物合成Glu的调节机制 （1）α-酮戊二酸脱氢酶在Glu产生菌中先天性的缺失或微弱（尤其是在生物素缺乏的条件下)，TCA循环到达α-酮戊二酸即受阻。 （2）Glu产生菌中的L- Glu脱氢酶的活力很强，α-酮戊二酸在Glu脱氢酶催化下氨基化生成Glu（需引入NH4+ ）。 （3）通过控制生物素亚适量，引起代谢失调使Glu得以积累。 生物素对糖代谢的调节 生物素还影响细胞膜的通透性，后述 * ① 生物素对糖代谢速度的影响 生物素影响糖代谢的速度而不是EMP与HMP途径的比率。 数据：生物素充足时HMP占38%，亚适量时26%。 没有显著影响。 * 在生物素充足的条件下，Pyr趋于生成乳酸的反应。 大量合成Glu所需要的生物素浓度比菌体生长的需要量 低，即为菌体生长需要的“亚适量”。一般5~10μg/L ② 生物素对CO2固定反应的影响 生物素是丙酮酸羧化酶的辅酶，参与CO2固定反应。 * DCA循环的关键酶是异柠檬酸裂解酶和苹果酸合成酶。 异柠檬酸裂解酶受Glc、琥珀酸阻遏，为HAC所诱导。 ③ 生物素对DCA循环的影响 在以Glc为原料时，通过控制生物素亚适量，几乎看不到异柠檬酸裂解酶的活性，DCA循环基本上是封闭的。代谢流向异柠檬酸 α-酮戊二酸 Glu的方向高效率地移动。 （4）∵Glu对Glu脱氢酶存在着反馈抑制和反馈阻遏， ∴胞内产物 L