制何首乌对大鼠肝CYP1A2酶活性及mRNA表达的抑制-世界中医药.PDF

世界中医药　２０１６年３月第１１卷第３期 ·４７５· 实验研究 制何首乌对大鼠肝 ＣＹＰ１Ａ２酶活性及 ｍＲＮＡ 表达的抑制作用 吴　双　杨红莉　李　浩　孙震晓 （北京中医药大学中药学院，北京，１００１０２） 摘要　目的：考察制何首乌水提物对大鼠肝细胞色素Ｐ４５０酶亚型ＣＹＰ１Ａ２的酶活性及ｍＲＮＡ表达的影响。方法：水回流 提取得制何首乌水提物，ＨＰＬＣ确定主要成分并测定其含量。大鼠随机分为空白对照组、制何首乌水提物组（２ｇ／ｋｇ和２０ ｇ／ｋｇ），给药组每天按 １０ｍＬ／ｋｇ量灌胃给予制何首乌水提物，连续７ｄ。取肝分离肝微粒体，ＨＰＬＣ测定肝微粒体对 ＣＹＰ１Ａ２酶的底物非那西丁的代谢消除率，考察肝微粒体ＣＹＰ１Ａ２酶活性；实时荧光定量ＰＣＲ技术检测肝组织中ＣＹＰ１Ａ２ 基因ｍＲＮＡ的表达。结果：与空白对照组相比，制何首乌水提物２０ｇ／ｋｇ组大鼠肝ＣＹＰ１Ａ２酶活性和ｍＲＮＡ的表达均明显 降低（ＣＹＰ１Ａ２酶活性，Ｐ＜００１；ＣＹＰ１Ａ２的ｍＲＮＡ表达，Ｐ＜００５）。结论：制何首乌水提物２０ｇ／ｋｇ对大鼠肝ＣＹＰ１Ａ２酶 活性和ｍＲＮＡ的表达有明显抑制作用。 关键词　制何首乌水提物；ＣＹＰ１Ａ２；大鼠肝微粒体；酶活性；ｍＲＮＡ表达 ＰｒｏｈｉｂｉｔｉｖｅＥｆｆｅｃｔｏｆＰｒｏｃｅｓｓｅｄＰｏｌｙｇｏｎｕｍＭｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍｏｎＣＹＰ１Ａ２ＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄｍＲＮＡＥｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＲａｔｓ ＷｕＳｈｕａｎｇ，ＹａｎｇＨｏｎｇｌｉ，ＬｉＨａｏ，ＳｕｎＺｈｅｎｘｉａｏ （ＣｏｌｌｅｇｅｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＢｅｉｊｉｎｇＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１００１０２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ　Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｆｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｃｅｓｓｅｄＰｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍｏｎｅｎｚｙｍａｔｉｃａｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄ ｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣＹＰ１Ａ２ｉｎｒａｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｃｅｓｓｅｄＰｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍｗａｓｏｂｔａｉｎｅｄｔｈｒｏｕｇｈ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｗｉｔｈｗａｔｅｒａｎｄｖａｃｕｕｍｄｒｙｉｎｇａｎｄｔｈｅｍａｉｎｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｗｅｒｅｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙＨＰＬＣ．Ｒａｔｓｗｅｒｅｒａｎｄｏｍｌｙｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏｔｈｅ ｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐａｎｄ２ｇ／ｋｇＢＷａｎｄ２０ｇ／ｋｇＢＷｔｈｅｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｃｅｓｓｅｄＰｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅａｄｍｉｎｉｓ ｔｒａｔｉｏｎｇｒｏｕｐｗａｓｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｌｙｇｉｖｅｎｗｉｔｈｗａｔｅｒｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｐｒｏｃｅｓｓｅｄＰｏｌｙｇｏｎｕｍｍｕｌｔｉｆｌｏｒｕｍ１０ｍＬ／ｋｇａｄａｙ，ａｎｄｔｈｅｂｌａｎｋｃｏｎ ｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓｇｉｖｅｎｔｈｅｓａｍｅｖｏｌｕｍｅｄｉｓｔｉｌｌｅｄｗａｔｅｒ．Ａｆｔｅｒｓｕｃｃｅｓｓｉｖｅａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎｏｆ７ｄ，ｔｈｅｌｉｖｅｒｍｉｃｒｏｓｏｍｅｓｗｅｒｅｐｒｅｐａｒｅｄ ｆｒｏｍｉｓｏｌａｔｅｄｒａｔｌｉｖｅｒ，ａｎｄｍｅｔａｂｏｌｉｓｍｅｌｉｍｉｎａｔｉｏｎｒａｔｅｓｏｆｐｈｅｎａｃｅｔｉｎｏｆＣＹＰ１Ａ２ｅｎｚｙｍｅｓｕｂｓｔｒａｔｅｗｅｒｅａｓｓａｙｅｄｂｙＨＰＬＣｔｏｄｅ ｔｅｒｍｉｎｅＣＹＰ１Ａ２ｅｎｚｙｍｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｉｎｒａｔｌｉｖｅｒｍｉｃｒｏｓｏｍｅｓｏｆｅａｃｈｇｒｏｕｐ．Ｍｅａｎｗｈｉｌｅ，ｔｏｔａｌＲＮＡｏｆｒａｔｌｉｖｅｒｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｔｏｄｅｔｅｒ ｍｉｎｅｔｈｅｍＲＮＡｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓｏｆＣＹＰ１Ａ２ｉｎｒａｔｌｉｖｅｒｂｙｑＲＴＰＣＲ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｔｈｏｓｅｉｎｂｌａｎｋｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ