兔V2肿瘤的离体培养及有关生物学特性..docVIP

兔VX2肿瘤的离体培养及有关生物学特性 ：苏畅，张惠中，李文海，林芳，梁晓华，江吕泉， 程庆书 关键词】肿瘤细胞 Cultu reinvitroand relatedbiolo gicalcharact eristicsofra bbitVX2carci nomacells A bstract 】AIM： Toseparatean dpurifythera bbitVX2carci nomacellline invitroandto characterize itsbiologica lfeatures. ME ereisolateda ndculturedwi esandenzymat icdigestioni hecellmorpho logy,cellcyc ecityinrabbi tsandnudemic S：Thenewlyes tablishedcel ontinuouscul tureover50pa ogically,VX2 cellswereuni ithelialcell s. Thecellswe cytoplasmicr atio. Thecell phase,%inG2phaseand%inSp ngtimewash. T hechromosoma loidwithamed ianchromosom ecityinrabbi tsandnudemic THODS：VX2tum orfragmentsw thexplantcul turetechniqu nvitro. After40passages,t le,karyotype andtumorigen ewereinvesti gated. RESULT llineVX2wasm aintainedinc ssagesfor8mo nths. Morphol form,roundan dpolygonalep resmallbutha dahighnucleo cycleanalysi sshowed%inGl hase. Thepopu lationdoubli lanalysissho wedahypotrip enumberof60. Thetumorigen ewillbeensur edunderahigh VX2cellinocu latingconcen tration. CONC LUSION：TheVX 2isasquamous cellcareinomaresultingfr ommalignantc hangeinapapi llomainduced withtheShope virusinrabbi ts. Ithasalre adybeenpurif iedinvitro,a ndcanbeappli edtofurtherr esearches. Keywords ] rab bits；tumorce 11s, cultured ； tumormarker s, biology 】目的：在体外分离纯化VX2肿瘤细胞，观察其 生物学特性.方法：采用组织块法和消化法结合对兔VX 2肿 瘤进行原代培养,体外传代观察，传代40次并对培养细胞进 行形态学观察、细胞周期检查、核型分析、兔及裸鼠移植. 结果：纯化的兔VX2肿瘤细胞形态一致，呈圆形、多角形的 上皮细胞，体积小，核浆比倒置，体外连续培养8mo,传代50次 以上，细胞倍增时间为h，细胞周期测定G1期为％，G 2期为％，S 期为％.染色体为亚三倍体核型，众数为60条.高细胞浓度可 保证同种移植成瘤率，裸鼠移植可成瘤，无支原体污染.结论: 兔VX2肿瘤细胞系来源于Shope病毒致乳头瘤恶变形成的鳞 状上皮细胞恶性肿瘤，目前已经纯化，可应用于进一步肿瘤 实验研究. 关键词】兔;肿瘤细胞，培养的;肿瘤标记，生物学 0引言 兔VX2肿瘤是来源于Shope病毒致乳头瘤恶变形成的上 皮细胞恶性肿瘤，属于鳞状细胞癌，1940年建株［1］，国内 文献对其来源描述不统一.其特点可接种在兔体内，具有较 高的肺、肝转移特性，在大型动物模型的研究上具有很高的 应用价值.国际上一直没有建成受到公认并广泛使用的VX2 细胞系，多数仍以组织块方法保存.为进一步进行离体研究， 我们分离并纯化了 VX2瘤株，并进行了生物学特性观察. 1材料和方法 材料新西兰大白兔9只和BALB/c裸鼠均购自第四军医大 学实验动物中心；原代培养所用肿瘤组织来源于本院液氮保 存冰冻组织块，于新西兰大白兔腿部肌肉内接种并增殖.胎 牛血清；培养瓶;RPMI1 640； 24 孔板(Nun c，Roskilde，D enmark)；广谱抗细胞角蛋白(PCK)混合型鼠抗兔mAb，广谱 抗细胞波形蛋白鼠抗猪mAb；秋水仙