三点测交-(精选·公开·课件).ppt

遗传学实验—三点测交 一、实验目的 1、掌握三点测交的原理及方法 2、学习三点测交的数据统计处理及分析方法 3、了解绘制遗传学图的原理和方法 4、了解果蝇的生活 5、掌握果蝇的麻醉及观察方 6、通过实验学习掌握果蝇性别的鉴定方 7、加深理解遗传学基因连锁与互换定律的本质 果蝇的直刚毛和卷刚毛 果蝇的白眼与红眼 果蝇的长翅与小翅 二、实验试剂和器材 （二）试剂 ： 乙醚,乙醇,酵母粉,丙酸,玉米粉,绵白糖,琼脂条 （三）器材： 恒温培养箱,高压灭菌锅,显微镜,架盘天平,培养瓶,棉花塞,麻醉瓶,滤纸片,牛皮纸 三、实验原理 连锁交换定律：处在同一染色体上的两个或两个以上基因遗传时，联合在一起的频率大于重新组合的频率。重组类型的产生是由于配子形成过程中，同源染色体的非姊妹染色单体间发生了局部交换的结果。 三点测交：用野生型纯合体与三隐性个体杂交，获得三因子杂种（F1），再使F1与三隐性基因纯合体测交，通过对测交后（Ft）代表现型及其数目的分析，分别计算三个连锁基因之间的交换值，从而确定这三个基因在同一染色体上的顺序和距离。 通过一次三点测验可以同时确定三个连锁基因的位置，即相当于进行三次两点测验，而且能在试验中检测到所发生的双交换 四、实验内容 1、选处女蝇：每组正、反交各1瓶，在8-12h内收集处女蝇5-6只，可提前2-3天收集。 2、杂交：将处女蝇、雄蝇各5-6只，麻醉、转移到新的杂交瓶中，确保杂交瓶中各只果蝇完全苏醒，没有死蝇。贴好标签，注明杂交组合、日期、姓名，于25℃培养； 3、释放亲本? 7d后，处死杂交亲本（一定要干净） 4、观察F1：再过4-5天，F1成蝇出现，连续观察2—3天，或在处死亲本7天后，集中观察记录F1表型。 4、 F1互交：选取5-10对F1果蝇，转入一新培养瓶（不需处女蝇，正交和反交F1不能混），贴好标签，于25℃培养。 5、释放亲本： 7d后，杀死F1代亲本果蝇。 6、观察F2： 再过4-5d，F2成蝇出现，开始观察眼色，翅形及刚毛形态，同时记录F2各种性状果蝇的数目 ，连续统计7-8d。 注意：（1）要求每组至少统计250只果蝇。 （2）做正交只需统计雄性个体。 （3）统计过的果蝇放入酒精瓶中，杀死 。 五、实验观察结果的统计与计算分析： 把观察到的果蝇性状种类和数量分别填入下表 内.根据遗传学统计分析方法,分别计算本实验中的二个单交换率和一个双交换率.依据计算和分析结果,确定出这三个基因彼此间的直线连锁关系及其基因间的图距,并会出三个基因的连锁图谱.另外,分析一下两个单交换之间是否存在干涉现象. 下表为果蝇三点测交试验性状观察结果统计表 08生物科学四班：白秀英、康慧、 王超、田劲 * 雌 雄 （一）材料： 野生型果蝇（+++）： 红眼、长翅、直刚毛 三隐性果蝇（wmsn3）：白眼、小翅、焦刚毛 这三个基因都位于X染色体上 + + + m sn3 w m sn3 w × m sn3 w m sn3 w m sn3 w + + + × （♂） ♀ （♂） ♀ m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w + + + m sn3 w m + + + sn3 w + + + m sn3 w m sn3 + + + w + + + + sn3 + m sn3 w m + w + + + P： F1： （测交） * * 08生物科学四班：白秀英、康慧、 王超、田劲