真养产碱杆菌112R的二羧酸单酰胺酰胺水解酶-微生物学报-中国.PDF

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 ’( )! 1’ ) # 年 月 $%% $ !#$ %’()(*(+$ ,-$ *+,-./-0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 真养产碱杆菌!!#$ 的二羧酸单酰胺酰胺水解酶 张英姿 王 宇 余志华 刘阳剑 王 绛 丁久元 （中国科学院微生物研究所 北京#%%%C% ） 摘 要：在一株具有环酰亚胺转化活性的真养产碱杆菌##$D 中发现了一种特异性的二羧酸 ! 单酰胺酰胺水解酶（半酰胺酶），它催化环酰亚胺代谢的第二步反应，将二羧酸单酰胺水解为 二羧酸和氨。该酶的底物仅限于此代谢途径的第一个酶———酰亚胺酶的产物二羧酸单酰胺， 而对其它的酰胺类化合物没有明显水解活性。真养产碱杆菌 ##$D 中的半酰胺酶和酰亚胺 ! 酶在表达上具有相关性，环酰亚胺（如琥珀酰亚胺）和二羧酸单酰胺（如琥珀酰胺酸）对它们有 正调控作用，游离氨离子显示出负调控作用，琥珀酸则在酶合成和活性两方面均表现出影响 作用。对重组大肠杆菌中表达的半酰胺酶粗酶的部分性质进行了研究。钴离子对半酰胺酶 的活性表现出促进作用，比活力提高到 ) 倍，表明半酰胺酶可能是一种金属结合酶。 关键词：二羧酸单酰胺酰胺水解酶，半酰胺酶，环酰亚胺代谢，酰亚胺酶，真养产碱杆菌 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） EFF G %%%#3B$%= $%% %#3%%C3% 环酰亚胺是一类环酰胺化合物，长期以来，有关环酰亚胺代谢的研究一直是与一些抗 癫痫药物，如 乙基 苯基海因和 甲基 苯基琥珀酰亚胺等在哺乳动物体内的脱毒作 3 3F3 13 3 3 ! ［，］ ［］ # $ 用相关的 。最近， 等 首先在一株芽生杆菌 中发现了一 H8/I/ !#$%’#(%)* ;J ) G# J3! 条新的环酰亚胺代谢途径（图 ），随后的研究表明，这一代谢途径广泛存在于细菌、酵母 # ［］ ! 和霉菌中 。作为一种生产有机酸的新路线以及酶法合成手性化合物的新工具，微生物 ［，］ 环酰亚胺代谢途径及其相关酶类显示出了广泛的应用潜力F B 。 图 推测的琥珀酰亚胺代谢途径 ! *58 ) # K-’J’;+6 4+L/,’(5 J/LAI/0 M’- ;.575456+ NOG：