银杏叶中异鼠李素对RAW2647细胞向破骨细胞分化-口腔疾病防治.PDF

·158 · 口腔疾病防治 2018年3月 第26卷 第3期 [DOI]10.12016/j.issn.2096⁃1456.2018.03.004 ·基础研究 · 银杏叶中异鼠李素对RAW264.7细胞向破骨细 胞分化的影响及其分子机制 1 1 2 1 2 1 1，2 李婧 ， 程梁 ， 郭吕华 ， 李彤 ， 杨沫扬 ， 王俊妹 ， 吴哲 1.吉林大学口腔医学院修复科，吉林长春（130021）；2.广州医科大学口腔医学院修复科，广东广州（510500） 【摘要】 目的 探讨银杏叶中异鼠李素（isorhamnetin，ISO）对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及其可 能的相关分子机制。方法 在核因子κB受体活化因子配基（receptoractivatorofNF⁃κBligand，RANKL）诱导 RAW264.7细胞分化为破骨细胞的同时，加入不同浓度的ISO（1～10μM），研究其对RAW264.7细胞向破骨细 胞分化的影响，通过CCK8法检测及评估各作用浓度ISO的细胞毒性，通过抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate⁃resis⁃ tantacidphosphatasestaining，TRAP）染色及骨片吸收效果判定其对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响。 实时定量PCR检测破骨细胞分化过程的标志性基因：TRAP、组织蛋白酶K（cathepsinK，Ctsk）、金属基质蛋白 酶9（matrixmetalloprotein，MMP⁃9）；分化相关转录因子：原癌基因c⁃Fos（proto⁃oncogeneprotein，c⁃Fos）、核 转录因子激活的T细胞 1（nuclearfactorofactivatedT⁃cellscytoplasmic 1，NFATc1）的表达及破骨细胞分化 下游因子NF⁃κBp65信号通路的磷酸化水平。结果 不同浓度的ISO（1～10μM）对RAW264.7细胞无细胞毒 性，并且能抑制TRAP活性，减少骨吸收陷窝数量，在浓度为10μM时最为显著；ISO能显著降低TRAP、Ctsk、 MMP⁃9、c⁃Fos、NFATc1及NF⁃κBp65的mRNA表达。结论 ISO对RAW264.7细胞向破骨细胞的分化具有抑 制作用，其机制可能与经典NF⁃κB通路的抑制有关。 【关键词】 银杏叶提取物； 黄酮类化合物； 异鼠李素； 破骨细胞； 破骨分化； 核因子κB受体活化因 子配基； 核因子κB受体活化因子 【中图分类号】 R783.4 【文献标志码】 A 【文章编号】 2096⁃1456（2018）03⁃0158⁃08 【引用著录格式】 李婧，程梁，郭吕华，等.银杏叶中异鼠李素对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响及 其分子机制[J]. 口腔疾病防治,2018,26(3): 158⁃165. Effect and molecular mechanism of isorhamnetin extracted from Ginkgo biloba on the differentiation of 1 1 2 1 2 RAW264.7 cellsintoosteoclasts LIJing,CHENGLiang,GUOLühua,LITong,YANGMoyang,WANGJun⁃ 1 1，2 mei,WUZhe . 1.DepartmentofProthodontics,SchoolandHospitalofStomatology,JilinUniversity,Changchun 130021, China; 2. Department of Prothodontics, Stomatology School of Guangzhou Medical University, Guangzhou 510500,China Correspondingauthor:LIJing,Email:m