黄芩素通过抑制核转录因子一KB活性减轻-中华危重病急救医学.PDF

·228· CritCare 宦堡鱼重病急救医学2017年3月第29卷第3期ChinMed，March2017，V01．29，No．3 ·论著· 黄芩素通过抑制核转录因子一KB活性减轻 小鼠肠缺血／再灌注致急性肺损伤 储磊 朱奋勇 周文俊杜忠祥李杰王小红 王立晖 刘安定 212300江苏丹阳，丹阳市人民医院检验科(储磊、朱奋勇、周文俊、杜忠祥)，脑外科(李杰)， 消化内科(王小红)，中心实验室(王立晖)；430030湖北武汉，华中科技大学同济医学院附属 同济医院实验医学研究中心(刘安定) 通讯作者：储磊，Email：chulei0520@163．com DOI：10．3760／ema．j．issn．2095—4352．2017．03．007 【摘要】 目的探讨黄芩素对小鼠肠缺血／再灌注(I／R)致急性肺损伤(ALI)的作用及机制。方法按 随机数字表法将24只清洁级健康雄性C57B堋小鼠分为假手术(Sham)组、I／R组和黄芩素+I／R组，每组 h 8只。采用夹闭系膜上动脉90min后恢复灌注制备肠I／R诱发小鼠肺损伤模型；黄芩素+I／R组于制模前1 腹腔注射黄芩素100 h后处死小鼠取下腔静 mg／kg；Sham组小鼠不钳夹血管，其余操作同I，R组。于再灌注4 脉血和肺组织标本。苏木素一伊红(HE)染色，光镜下观察小鼠肺组织病理学变化，并进行病理学评分；测定 肺湿，干重(W／D)比值；采用原位末端缺刻标记试验(TUNEL)检测肺组织细胞凋亡情况；采用酶联免疫吸附 试验(ELISA)检测血清肿瘤坏死因子一Ot(TNF一0【)和白细胞介素一6(IL一6)含量；采用实时定量反转录一聚合 Blot) 酶链反应(RT—PCR)检测肺组织TNF一仪和IL一6的mRNA表达水平；采用蛋白质免疫印迹试验(Western 检测肺组织胞质核转录因子一KB(NF—KB)抑制因子一Ot(IKB一0【)和胞核NF—KB的蛋白表达水平。结果光镜 下观察显示，Sham组小鼠肺泡结构完整，无明显病理学改变；I／R组小鼠肺组织结构严重破坏，肺泡壁明显增 厚，肺间质水肿，大量炎性细胞浸润；黄芩素+I／R组小鼠肺泡及间质水肿程度明显减轻，有少量炎性细胞浸润。 与Sham组比较，I／R组肺组织病理学评分、W／D比值明显升高，细胞凋亡指数显著增加，血清TNF—d、IL一6含 量及其肺组织mRNA表达均明显增加，胞质IKB—d蛋白表达明显下降，胞核NF—KB蛋白表达明显升高；而给 予黄芩素预处理可明显改善上述肠I，R诱导的肺组织损伤，表现为与I／R组比较，黄芩素+I／R组肺组织病理学 mRNA(2～act)：16．45±4．39比27．69±6．82]， 肺组织TNF一仪mRNA(2““‘)：4．75±2．38比7．69±2．32，IL一6 胞质IxB—d蛋白表达明显升高(灰度值：0．47±o．11比o．27±0．09)，胞核NF—KB蛋白表达明显下降(灰度值： o．57±0．13比1．07±0。34)，差异均有统计学意义(均P0。05)。结论黄芩素可能通过抑制炎症反应和细胞 凋亡，从而减轻肠I／R所致ALl。 【关键词】黄芩素；肺损伤，急性；缺血／再灌注损伤，肠；炎症；凋亡；核转录因子一KB 基金项目：国家自然科学基金 acute inducedintestinal viainhibitionofnuclear Baicaleinattenuates lun