丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌地影响.docVIP

丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌体外混合培养对肠道致病菌的影响 [摘要] 本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养对肠道中沙门氏菌、金黄色葡萄球菌 、产气荚膜梭菌和大肠杆菌4种致病菌的影响。结果表明：丁酸梭菌对这4种菌均有明显的抑制作用，可使其菌落数下降3～5个数量级；鼠李糖乳杆菌可降低产气荚膜梭菌、沙门氏菌菌落数；丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌混合培养可使4种致病菌菌落数均下降3～4个数量级。 由此可见，两种菌混合培养对 4 种病原微生物的抑制无协同作用。 [关键词] 丁酸梭菌；鼠李糖乳杆菌；混合培养；肠道致病菌 [Abstract] This experiment was conducted to study the effects of the mixed culture of Clostridium butyricum and Lac- tobacillus rhamnosus on intestinal pathogens，including Salmonella gallinarum，Staphylococcus aureus，Clostridium perfrin- gens and Escherichia coli.The results showed that：the Clostridium butyricum significantly inhibited the number of these four types of bacteria and made them down 3 ～ 5 orders of magnitude；Lactobacillus rhamnosus reduced Clostridium per- fringens，Salmonella gallinarum colonies；the mixed culture of Clostridium butyricum and Lactobacillus rhamnosus made four kinds of bacteria down 3 ～ 4 orders of magnitude.The results indicated that the mixed culture of strains had no syner- gistic inhibition effect on the four kinds of pathogenic microorganisms. [Key words] Clostridium butyricum；Lactobacillus rhamnosus；mixed culture；enteric pathogens 丁酸梭菌属于梭菌属， 是一种专性厌氧的革 兰氏阳性芽孢杆菌，其广泛分布于土壤，也能从 健康动物的肠道中分离出来。 丁酸梭菌适合动物 的肠道厌氧环境（呼慧娟等，2011），可以控制消 化道紊乱（张晓阳等，2012），有效抑制有害菌（曹 广添等，2012）。 鼠李糖乳杆菌属于乳杆菌，具有 较强的酸及胆碱耐受能力 （王玉华等，2008），有 抑制有害菌的作用 （吴光伟和韩建春，2009），具 有抗氧化活性，并且可以影响机体免疫功能。 目 前丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌均被广泛用作饲料 添加剂，本试验研究了丁酸梭菌与鼠李糖乳杆菌 联合培养对产气荚膜梭菌、 金黄色葡萄球菌、沙 门氏菌、大肠杆菌的抑制作用，为微生物制剂联 和使用提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试验材料 1.1.1 菌种、试剂及培养基 丁酸梭菌（Clostridi- um butyricum，HJCB998），由浙江惠嘉生物科技有 限公司提供；鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamno- sus，ATCC7469)、 产气荚膜梭菌 (Clostridi um per- fringens，ATCC13124)， 均由广东省微生物菌种保 藏中心提供； 大肠杆菌 C83928 （Escherichia coli C83928）、沙门氏菌 （Salmonella gallinarum，C79）、 金 黄 色 葡 萄 球 菌 （Staphylococcus aureaus， SHZ018）， 均由浙江大学动物科学学院研究室提 供。 琼脂、氯化钠为分析纯。 厌氧液体培养基、LB 液体培养基、LB 琼脂培养基、 强化梭菌培养基 (RCM)、DRCA 梭菌选择性培养基、 伊红美蓝培养 基（EMB）、 乳酸细菌培养基 （MRS）、BP 培养基、 HE 培养基、SC 培养基，均购自北京陆桥生物科技 有限公司。 1.1.2 主要仪器与设备 厌氧培养箱、灭菌锅、恒 温培养箱、培养皿、超净工作台、试管、接种环等。 1.2 试验方法 1.2.1 菌种活化 丁酸梭菌活化：