脓汁和粪便标本中病原菌的检测-3教学材料.pptVIP

斜面4支，空气、手指皮肤、细菌分离培养物（上次实验平板） 器材准备 WHO推荐的医院各部门空气细菌标准 级别 cfu/m3 适用范围 Ⅰ级区 ＜10 器官移植、心血管、矫形等外科手术室，保护性隔离室等，灌注或配制注射液实验室 Ⅱ级区 ＜200 无菌室、手术室、供应室、婴儿室、中心灭菌单位、术后恢复室、早产儿及产房、重症监护病房 Ⅲ级区 200～500 一般病房、治疗室、放射室、衣帽室、按摩室、盥洗室、小手术室浴室 Ⅳ级区 传染病科、同位素室 Ⅴ级区 卫生间、贮藏室、太平间等 我国公共场所空气卫生细菌学标准 （GB9663～9673-1996，GB16153-1996,平皿直径9cm） 撞击法cfu/m3 沉降法个/皿 适用范围 ≤1000 ≤10 3～5星级宾馆、饭店 ≤1500 ≤20 2星级以下宾馆和非星级带空调宾馆、饭店 ≤2500 ≤30 普通饭店、招待所、酒吧、茶座、咖啡厅、图书馆、博物馆、美术馆、飞机客舱 ≤4000 ≤40 音乐厅、影剧院、游艺厅、舞厅、理发店、美容院（店）、游泳馆、体育馆、医院候诊室、候机室、旅客列车车厢、轮船客舱、饭馆（餐厅） ≤7000 ≤75 展览馆、商场（店）、书店、候车室、候船室 手指皮肤的细菌学检查 甲和乙、丙和丁共用1个平板 上:甲、丙→常规洗手 下:乙、丁→标准洗手 第1格为洗手前， 第2格为洗手后， 第3格为消毒后， 第4格空白对照。 在培养基表面触摸2～3厘米 甲（丙） 乙（丁） 1 2 3 4 手指皮肤细菌检查结果分析 比较洗手前后细菌的种类。 洗前细菌种类多。 洗后细菌种类少。 洗手能洗掉大多数暂住菌。 比较常规和标准洗手的细菌数量。 常规（简单）洗手，平板上细菌数量少。 标准洗手，平板上细菌数量多。原因：常住菌数量大，牢固附着在皮肤上，常洗不掉， 可洗松动，经摩擦接种、脱落到培养基上，显示细菌更多？ 外科手术人员洗手？ 碘酒和酒精棉球消毒以后，有没有细菌生长？ 空白对照有没有细菌生长？ 洗手前没有细菌生长？ 脓汁和粪便标本中病原菌的检测实验流程(6次课12学时） ①培养基的制备 ②细菌的分离培养 ③细菌的纯培养 ④细菌的形态学检查 ⑤细菌的生化试验等 ⑥细菌的血清学试验、结果分析→实验论文撰写 菌落特征 Bacterial Colony Characteristics 大小：大(直径约3mm以上)，中(直径约1～3mm)，小(直径约1mm以下)。 形状：圆形，卵圆形、假根形、丝状、不规则等。 边缘：整齐，锯齿状，波浪状，羽毛状。 表面：隆起、平坦、中心凸起、脐形凹陷；光滑或粗糙、湿润或干燥。 色素：一般为无色或灰白色，特殊色素有两类：脂溶性色素(菌落本身着色，培养基不着色)和水溶性色素(菌落及培养基均着色)。 溶血性：不溶血，不完全溶血(菌落周围呈草绿色、不透明)，溶血(菌落周围出现透明环)。 金黄色葡萄球菌菌落特征 X-SA?琼脂 培养基添加了显色酶基质，金黄色葡萄球菌形成淡蓝色菌落 。 血琼脂 菌落直径约2mm、圆形、隆起、表面光滑、湿润、边缘整齐，菌落周围有透明的β溶血环，溶血菌株大多有致病性。 Baird-Parker琼脂 菌落黑色，奶油状，表面光滑，湿润，圆形，凸起，有光泽，边缘整齐，周围绕以不透明圈 ( 沉淀 ), 其外常有一清晰带 ( 卵磷脂环 ) 。 链球菌菌落特征 血琼脂 甲型溶血性链球菌，菌落周围有1~2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血。 血琼脂 乙型溶血性链球菌，菌落周围有2~4mm宽、红细胞完全溶解、透明的溶血环，称乙型溶血或β溶血。 血琼脂 丙型链球菌，不产生溶血素，菌落周围无溶血环，称不溶血性链球菌或γ溶血。 甲型 乙型 丙型 伤寒沙门菌菌落特征 HE琼脂 Hektoen Enteric Agar 沙门菌产生蓝绿色、黑色中心菌落 XLD琼脂 Xylose Lysine Desoxycholate Agar 沙门菌产生较小黑色菌落 SS琼脂 Salmonella Shigella Agar 沙门菌产生较小黑色菌落 志贺菌菌落特征 HE琼脂 Hektoen Enteric Agar 形成不发酵乳糖 的深绿色菌落。 麦康凯琼脂 MacConkey Agar 形成较小的，无色半透明不发酵乳糖的菌落。 SS琼脂 Salmonella Shigella Agar 菌落圆形、液滴状、边缘整齐，湿润，无色半透明。 大肠埃希菌菌落特征 麦康凯琼脂 MacConkey Agar 含乳糖及中性红指示剂，菌落呈红色。 伊红美蓝琼脂 eosin methylene blue Agar 分解乳糖产酸，使伊红与美蓝结合而形成紫黑色菌落，具有金属光泽。 SS琼脂 Salmonella Shigella Agar 分解乳糖产酸，使胆