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祖师麻凝胶膏剂提取工艺的研究 　　摘要：目的 优选祖师麻凝胶膏剂的提取工艺。方法 以祖师麻甲素含量为考察指标，以溶剂用量、浸泡时间、提取时间为考察因素，采用正交试验进行工艺优选。结果 祖师麻药材的最佳提取工艺为：脱脂祖师麻药材加水30 mL，浸泡1.5 h，回流提取2.0 h，提取1次。祖师麻甲素的平均含量为9.83 mg/g。结论 该提取工艺稳定可行，节约能源，为祖师麻凝胶膏剂的生产工艺提供了依据。 　　关键词：祖师麻凝胶膏剂；提取工艺；正交试验；祖师麻甲素；高效液相色谱法 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2014.08.021 　　中图分类号：R283.5 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2014）08-0073-03 　　祖师麻凝胶膏剂为本院自主研发的中药制剂，由祖师麻提取精制的浸膏粉和基质组成，具有祛风除湿、活血止痛功效。其主药祖师麻药材主要来源于瑞香科Thymelaeaceae瑞香属黄瑞香Daphne giraldii Nitsche、唐古特瑞香D.tangutica Maxiam或凹叶瑞香D.retusa Hemsl的根皮和茎皮，主要有效成分为瑞香素（7，8-二羟基香豆素，又称祖师麻甲素，Daphnetin）、瑞香苷（祖师麻乙素，Daphnin）、7-羟基香豆素（伞形酮，又称伞形花内酯，7-Hydroxycoumarin）、紫丁香苷（syringin）等[1-4]。本研究采用正交试验设计，以祖师麻甲素的含量为指标，优选祖师麻凝胶膏剂的最佳提取工艺。 　　1 仪器与试药 　　Agilent1120型高效液相色谱仪（美国安捷伦公司），AE260型万分之一电子天平（瑞士Mettle Toledo 　　基金项目：甘肃省普通中医药科研课题（GZK-2011-81）；兰州市第三批科技计划项目（2013-3-39） 　　通讯作者：石晓峰，Tel：0931-2614521，E-mail：shixiaofeng 2005@ 　　公司），CP225D型十万分之一电子分析天平（德国Sartorius公司），SHZ-D型循环水式真空泵（河南巩义市予华仪器有限责任公司），SK3310HLC型超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司），800型离心沉淀器（上海手术器械厂）。 　　祖师麻药材由甘肃泰康制药有限责任公司提供，原植物经甘肃省医学科学研究院何福江研究员鉴定为瑞香科植物唐古特瑞香D.tangutica Maxiam；祖师麻甲素对照品（批号110900-201006，供含量测定用）由中国食品药品检定研究院提供；甲醇、乙腈均为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。 　　2 方法与结果 　　2.1 祖师麻药材的脱脂处理 　　称取粉碎过筛（20～40目）后祖师麻药材500 g，置于圆底烧瓶中，加入石油醚（60～90 ℃）500 mL，浸泡24 h，过滤，药渣晾干，即得祖师麻脱脂药材。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取祖师麻甲素对照品适量，加超纯水加热溶解，定容，制成每1 mL含祖师麻甲素0.189 mg的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　精密称取祖师麻脱脂药材0.5 g，加水30 mL，称定质量，浸泡1.5 h，回流提取2 h，于室温放至恒重，过滤，滤液用超纯水定容至100 mL容量瓶。取10 mL上述溶液，3000 r/min离心30 min，上清液过0.45 μm微孔滤膜，作为供试品溶液。 　　2.4 色谱条件与系统适用性试验 　　色谱柱：Agilent Eclipse Plus C18（4.6 mm×250 mm， 5 μm）；流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液（15∶85）；流速：1.0 mL/min；检测波长：327 nm[5]；柱温：30 ℃；进样量：20 μL。 　　精密吸取上述对照品溶液、供试品溶液各20 μL，注入液相色谱仪，在此色谱条件下，样品中祖师麻甲素得到较好分离，与其相邻色谱峰分离度1.5，理论塔板数以祖师麻甲素峰面积计算不低于3000。色谱图见图1。 　　A 　　B 　　注：A.对照品；B.供试品；1.祖师麻甲素 　　图1 祖师麻药材中祖师麻甲素高效液相色谱图 　　2.5 线性关系考察 　　分别精密吸取祖师麻甲素对照品溶液100、150、200、250、300、350 μL至1 mL容量瓶中，用超纯水稀释至刻度。精密吸取上述对照品溶液各20 μL，依次进样，测定峰面积。以峰面积为纵坐标，对照品质量（μg）为横坐标，进行线性回归，得祖师麻甲素回归方程Y=4.090 28×107X+1 520 230（r=0.999 2），表明祖师麻甲素在0.378～1.323 μg范围内与峰面积积分值呈良好线性关系