第三章细胞养的基本方法.pptVIP

三.污染的预防 防止污染，预防是关键。 1）、培养操作前的准备 超净台保持清洁； 使用消毒后的器皿。 2）、培养操作时的注意事项 见无菌操作的注意事项。 四、污染的排除 1、使用抗生素； 2、加温处理； 3、动物体内接种除菌法； 4、巨噬细胞吞噬法 思考题 1、细胞培养时如何预防污染？ 2、列举无菌操作的注意事项。 六、 培养细胞的取材 取材组织用培养液浸泡，4度运送，24h内尽快培养。 取材无菌操作，避免对组织的机械损伤，尽量去除脂肪、神经、结缔、坏死组织，污染组织可用青链霉素和制霉菌素漂洗。 原代取材同时保留组织学和电镜标本，对供体来源、部位及一般情况做记录。 欲从组织中获得大量生长良好的细胞，须将组织分散开，使细胞解离出来。 常用方法有机械法和化学法。 第二节 培养细胞的观察 组织块培养法 将组织剪成小块后，接种于培养瓶，24小时贴壁后，细胞就从组织周围长出。 培养瓶底预先涂以胶原薄层，以利上皮细胞的生长。 如需做组织染色或电镜检查，可将组织可放入小盖玻片上后再放进培养瓶培养。 换液需轻巧，以免组织块漂起，细胞死亡 消化培养法 采用前述的组织消化分散法。将妨碍细胞生长的细胞间质去除，使细胞分散，形成悬液，按不同浓度接种培养瓶培养。 密度抑制（Density inhibition）或接触抑制（C