不结球白菜BrCDF1的功能研究.PDF

－ 　 南京农业大学学报　 ２０１８ꎬ４１(５):８３２ ８３８ ｈｔｔｐ:/ / ｎａｕｘｂ.ｎｊａｕ.ｅｄｕ.ｃｎ 　 Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ ＮａｎｊｉｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ＤＯＩ:１０.７６８５/ ｊｎａｕ.２０１７１２００８ － 李林ꎬ陈丽ꎬ吴小婷ꎬ等. 不结球白菜ＢｒＣＤＦ１的功能研究[Ｊ]. 南京农业大学学报ꎬ２０１８ꎬ４１(５):８３２ ８３８. 不结球白菜ＢｒＣＤＦ１ 的功能研究 李林ꎬ陈丽ꎬ吴小婷ꎬ邵帅旭ꎬ李英ꎬ侯喜林ꎬ刘同坤∗ (南京农业大学作物遗传与种质创新国家重点实验室/ 农业农村部华东地区园艺作物生物学 与种质创制重点实验室/ 园艺学院ꎬ江苏 南京 ２１００９５) 摘要:[目的]本文旨在研究不结球白菜ＢｒＣＤＦ１基因的功能ꎬ验证其与ＣＯ启动子之间的调控关系ꎬ以及其在植物抽薹开花 中所起的作用ꎮ [方法]以不结球白菜‘苏州青’为材料ꎬ采用酵母单杂交技术ꎬ验证 ＢｒＣＤＦ１转录因子与ＣＯ启动子是否能 够结合ꎻ构建过表达载体ｐＥａｒｌｙＧａｔｅ１０１￣ＢｒＣＤＦ１ꎬ利用农杆菌介导法将过表达载体导入拟南芥中ꎬ筛选阳性苗ꎬ同时对阳性 苗进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ꎬ观察转基因植株的表型变化ꎻ采用ＲＴ￣ｑＰＣＲ技术ꎬ检测ＢｒＣＤＦ１、ＣＯ、ＦＴ基因在转基因和野生型植 － 株中不同时间点的相对表达量ꎮ [结果]酵母单杂交和β 半乳糖苷酶试验分析结果显示ꎬＢｒＣＤＦ１转录因子和ＣＯ启动子之 间具有较高的结合活性ꎮ Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测结果表明:转基因拟南芥植株中的ＢｒＣＤＦ１蛋白成功表达ꎮ ＲＴ￣ｑＰＣＲ结果表明ꎬ ＢｒＣＤＦ１基因在转基因植株中的相对表达量比野生型植株高ꎻＣＯ、ＦＴ基因在转基因植株中的相对表达量比野生型低ꎬ同时 ＢｒＣＤＦ１过表达植株较野生型开花晚ꎮ [结论]ＢｒＣＤＦ１转录因子能与ＣＯ启动子结合ꎬ从而抑制ＣＯ、ＦＴ基因的表达ꎬ进而影 响不结球白菜光周期开花途径ꎮ 关键词:不结球白菜ꎻＢｒＣＤＦ１ꎻ酵母单杂交ꎻ功能特性 － － － 中图分类号:Ｓ６３４.３　 　 　 　 文献标志码:Ａ　 　 　 　 文章编号:１０００ ２０３０(２０１８)０５ ０８３２ ０７ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｏｆ ＢｒＣＤＦ１ ｉｎ ｎｏｎ￣ｈｅａｄｉｎｇ Ｃｈｉｎｅｓｅ ｃａｂｂａｇｅ ＬＩ ＬｉｎꎬＣＨＥＮ ＬｉꎬＷＵ ＸｉａｏｔｉｎｇꎬＳＨＡＯ ＳｈｕａｉｘｕꎬＬＩ ＹｉｎｇꎬＨＯＵ ＸｉｌｉｎꎬＬＩＵ Ｔｏｎｇｋｕｎ∗ (Ｓｔａｔｅ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｃｒｏｐ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ/ Ｋｅｙ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｇｅｒｍｐｌａｓｍ Ｅｎｈａｎｃｅｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｒｏｐ ｉｎ Ｅａｓｔ ＣｈｉｎａꎬＭｉｎｉｓｔｒｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒｅ ａｎｄ Ｒｕｒａｌ Ａｆｆａｉｒｓ/ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ ＨｏｒｔｉｃｕｌｔｕｒｅꎬＮａｎｊｉｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ ＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙꎬＮａｎｊｉｎ