绣球菌菌丝营养生理特性的研究.docVIP

绣球菌菌丝营养生理特性的研究 　　研究了绣球菌C2004菌株菌丝营养生理特性。结果表明，实验范围内绣球菌C2004菌丝生长最适碳源为糯米淀粉，适宜氮源为蛋白胨、酵母膏和豆饼粉；菌丝生长的最佳温度、抑制温度和最高致死温度分别为20.2 ℃、35 ℃和40 ℃，最适pH为5.25，培养料最适含水量为62.5%。?? 　　绣球菌； 菌丝生长； 培养参数?? 　　S646.901??A 　　 　　绣球菌［Sparassis crispa（Wulf.）Fries］又名绣球蘑、绣球蕈、花椰菜菌、地花蘑、白地花和白绣球花，其子实体肉质洁白细嫩，鲜美可口，营养丰富，特别是多糖含量较高（2.6%，是灵芝的3~4倍），是一种珍贵的食用菌。绣球菌着生于老熟松树林地或松树干基部，菌柄基与腐朽树根相连，分解纤维素，属明显的褐腐类型［1］。国内主要产于黑龙江、吉林、西藏、云南、福建、湖南和湖北等林区［1-4］；国外则分布于美国、加拿大、澳大利亚、英国南部和日本的本州、四国、北海道等地。该食用菌虽属世界分布，但是资源蕴藏量稀少。国内有关绣球菌研究则刚刚起步，为了开发该珍稀食用菌资源，本文就碳源、氮源、pH、温度和培养料含水量对绣球菌菌丝生长的影响进行了研究，旨在为绣球菌高产栽培提供理论依据。?? 　　 　　1 材料与方法 　　 　　1.1??供试菌株 　　绣球菌C2004为福建省农业科学院植物保护研究所保藏。?? 　　1.2?κ匝榉椒? 　　1.2.1?μ荚词匝? 　　在基础培养基［KH2PO4 1.0 g，（NH4）2SO4 2.0 g，MgSO4 0.5 g，琼脂20g，水1000 mL］中分别加2%的葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、糯米淀粉和甲基纤维素作为碳源，以基础培养基为对照，观察不同碳源对菌丝生长的影响。?? 　　1.2.2?Φ?源试验 　　在基础培养基（葡萄糖20g，KH2PO2 1.0g，MgSO2 0.5g，琼脂20g，水1000 mL）中分别加0.2%的(NH4)2 SO4、KNO3、尿素、蛋白胨、酵母膏和豆饼粉作为氮源，观察不同氮源对菌丝生长的影响。?? 　　1.2.3?ξ露仁匝? 　　以PDA培养基（马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂20 g，水1000 mL）为供试培养基，设10 ℃、15 ℃、20 ℃、25 ℃、30 ℃、35 ℃和40 ℃七个培养温度，观察不同温度对菌丝生长的影响。?? 　　1.2.4??pH试验 　　以PDA为供试培养基，50 mL的三角瓶中分装20 mL的培养基，灭菌后在50 ℃的水浴锅内用1N HCL或1N NaOH进行酸碱度调节，准确记录调整到各种酸碱度所需HCL/NaOH的量，按实验要求分别调节培养基pH为4.0、4.5、5.0、5.5、??6.0、6.5、7.0、7.5和8.0，然后制备平板培养基，接种培养，观察不同pH对菌丝生长的影响。?? 　　1.2.5??接种培养 　　上述试验均取1块直径6 mm的菌种块接种到２０ mL的平板培养基上，置于20 ℃恒温生化培养箱中培养(温度试验除外)。以菌丝粗细、疏密为据观测菌丝生长势，并计算菌丝生长速度。试验设5次重复。?? 　　1.2.6?ε嘌?料含水量试验 　　培养料配方：松木屑73.5%，糯米粉25%。另加红糖1.5%。其中松木屑、糯米粉烘干至恒重。?? 　　含水量分别设为40%、45%、50%、55%、60%、65%和70%七个梯度［含水量（%）=水分重量/（培养料干物质重量+水分重量）×100］。培养料充分混合后装入试管（30×200 mm），每支试管折合干料装料15 g，接种时在培养料面滴??1 mL无菌水(高压灭菌过程会造成培养料表面失水，加入1 mL无菌水会促进接种块菌丝的萌发，对培养料含水量的影响可计入系统误差)，接入直径为6 mm的菌种块，于20 ℃恒温生化培养箱中培养，观察菌丝生长势，并计算菌丝生长速度，试验设5次重复。?? 　　1.2.7?κ?据处理 　　采用DPS数据处理系统软件拟合曲线方程［5］。?? 　　2 结果与分析 　　 　　2.1?Σ煌?碳源对菌丝生长的影响 　　 　　试验结果表明，绣球菌C2004菌丝可利用多种碳源，但不同碳源对菌丝生长的影响显著不同（表1）。以糯米淀粉为碳源的菌丝生长速度最快，且菌丝健壮；其次是麦芽糖，菌丝长势较好；葡萄糖和蔗糖为碳源的菌丝生长速度和生长势一般；对照中菌丝虽能生长，但长势一般，与葡萄糖和蔗糖碳源的菌丝生长情况无显著差异，这可能与接种块中的菌丝储备的营养有关；而以甲基纤维素为碳源时，菌丝不能生长，推测其中含有抑制绣球菌菌丝生长的成分。综上结果，糯米淀粉是该菌株菌丝生长的最适碳源，麦芽糖次之。 　　 　　2.2?Σ煌?氮源对菌丝生