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一 绪论1．生物化学研究的对象和内容是什么？ 解答：生物化学主要研究:（1）生物机体的化学组成、生物分子的结构、性质及功能； （2）生物分子分解与合成及反应过程中的能量变化； （3）生物遗传信息的储存、传递和表达； （4）生物体新陈代谢的调节与控制。 2．你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。 提示：生物化学是生命科学的基础学科，注意从不同的角度，去理解并运用生物化学的知识。 3．说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相似的规侓。 解答：生物大分子在元素组成上有相似的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等 6 种是 解答 蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的 4 个电子可使碳与自身形成共价单键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共 价键。碳与被键合原子形成 4 个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多O 种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的需要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（—NH2） 、羟基（—OH） 、羰基（C） 、羧基（—COOH） 、巯基（—SH） 、磷酸基（—PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及 氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的许多关键作用密切相关。 生物大分子在结构上也有着共同的规律性。 生物大分子均由相同类型的构件通过一 定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是 20 种基本氨基 酸。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端→C 端）,蛋白质主链骨架呈“肽单 位”重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过 3′, 5′-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方 向性(5′、→3′ ),核酸的主链骨架呈“磷酸-核糖（或脱氧核糖） ”重复；构成脂质的构件 是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复结构；构成多糖的构件是单糖，单糖 间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。二 蛋白质化学1．用于测定蛋白质多肽链 N 端、C 端的常用方法有哪些？基本原理是什么？ 解答： （1） N-末端测定法：常采用 2, 4 ―二硝基氟苯法、Edman 降解法、丹磺酰氯法。 ① 2, 4 ―二硝基氟苯(DNFB 或 FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与 2, 4 ―二硝基氟苯 2, 4 ―DNFB） （ 反应 （Sanger 反应） 生成 DNP―多肽或 DNP―蛋白质。 ， 由于 DNFB 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此 DNP―多肽经酸水解后，只有 N―末端氨基 酸为黄色 DNP―氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。 ② 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNS―Cl）反应 生成 DNS―多肽或 DNS―蛋白质。 由于 DNS 与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定， 因此 DNS―多肽经酸水解后，只有 N―末端氨基酸为强烈的荧光物质 DNS―氨基酸，其余的都 是游离氨基酸。 ③ 苯异硫氰酸脂（PITC 或 Edman 降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰 酸苯酯（PITC）反应（Edman 反应） ，生成苯氨基硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中 加热时， N―末端的 PTC―氨基酸发生环化， 生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来， 除去 N―末端氨基酸后剩下的肽链仍然是完整的。 ④ 氨肽酶法： 氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶， 能从多肽链的 N 端逐个地向里切。 根据不同的反应时间测出酶水解释放的氨基酸种类和数量， 按反应时间和残基释放量作动力 学曲线，就能知道该蛋白质的 N 端残基序列。 （2）C―末端测定法：常采用肼解法、还原法、羧肽酶法。 肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反应中除 C 端氨基酸以游离形式存 在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。 ② 还原法： 肽链 C 端氨基酸可用硼氢化锂还原成相应的 α―氨基醇。 肽链完全水解后， 代表原来 C―末端氨基酸的 α―氨基醇，可用层析法加以鉴别。 ③ 羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的 C―末端开始逐个降解，释放出游 离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反应时间的而变化。根据释放的氨基酸量（摩尔 数）与反应时间的关系，便可以知道该肽链的 C―末端氨基酸序列。 2．测得一种血红蛋白含铁 0.426%，计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含 亮氨酸 1.65%和异亮氨酸 2.48%，问其最低相对分子质量是多少？ 解答： （1）血红蛋白：（最低相对分子质量＝2 ） 酶 铁的相对原子质量 55.8 ×100＝ ×100 = 13 100 铁的百分含量 0.426因为亮氨酸和异