探讨在HBV相关性肝脏疾病中外周血的骨桥蛋白(PN)、白介素12及白介素18的表达水平及其临床意义.docVIP

目的：探讨在HBV相关性肝脏疾病中外周血的骨桥蛋白(OPN)、白介素-12及白介 素-18的表达水平及苏临床意义。 方法：应用ELISA方法测定15例健康献血者(对照组)和62例HBV相关性肝脏 疾病患者和的外周血中的白介素-12、白介素-18及骨桥蛋白的表达水平，并分析 其相关性。 结果：骨桥蛋白在肝炎组、肝硬化组以及原发性肝癌组中的表达水平均显著高于 正常对照组的表达水平，与正常对照组相比^0. 05；骨桥蛋白在不同HBV相关 性疾病屮原发性肝癌组表达水平最高，之后为肝硬化组，肝炎组的表达水平最少; 慢性乙型肝炎患者血清按不同胆红素水平分为三组，血清中TBIL水平与0PN、 IL-12 及 18 表达呈正相关(r=0. 45, P0.01； r=0. 48, P0. 05； r=0. 79, P 0. 05)。在HBV-DNA复制程度对外周血骨桥蛋白及白介素_18表达水平无明显差 异，但与白介素-12表达水平有显著差异。 结论：骨桥蛋白、白介素-12及白介素-18在HBV相关性肝脏疾病屮的表达不同， 与其发生、发展及预后有关。 关键词:骨桥蛋白;白介素-12;白介素-18; Thl/Th2； ELISA； 第一章前 言 据世界卫生组织（W110）估计，全世界20多亿人曾经感染HBV,其屮 至少3. 5亿人成为HBV慢性携带者，大约每年100万人死于乙型肝炎病毒 引起的疾病［lh由此可见，乙型肝炎严重威胁着患者的生命，故在此领域的 研究也日益引起广泛的关注。 0前研究认为，乙型肝炎的发病及转归与细胞免疫机制有密切联系。 细胞因子对乙型肝炎有复杂的作用，而辅助性T细胞可分泌细胞因子，并 可分为Thl和Th2亚群。乙型肝炎患者在HBV病毒感染后病情易迁延变化， 故往往难以治愈，其重要原因之一就是机体免疫系统受到抑制后Thl/Th2 细胞失调导致无法发挥正常的免疫功能［2］。当Thl/Th2细胞失调时，如Thl 细胞占优势，可促进细胞免疫，并增强CD8+T细胞的活性，从而清除细胞 内病毒，但与此同时也可加重肝损害，并有发生急性和自限性感染的倾向。 如Th2细胞占优势，可抑制细胞免疫，同时可减轻肝细胞损伤，故而发生 持续性乙型肝炎病毒（HBV）感染［3\故了解及掌握乙型肝炎患者的Thl/Th2 细胞状态，对乙型肝炎的治疗是极其重要。 既往研究报道［‘1］，认为骨桥蛋白能启动Thl反应，导致Thl/Th2平衡 紊乱，使Thl占优势，从而导致肝大片坏死。骨桥蛋白（psteoppontin, 0PN） 是一种带负电荷的分泌磷酸蛋白（secreted phosphoprotein 1, SPP1） Ca］, 它参与了机体的许多病理、生理过程［6］。在肝脏疾病方面，包括肝癌切除 后移植、乙型肝炎患者、胆管癌等都表现了骨桥蛋白水平升高，且与疾病 的发生发展及预后也具有密切的相关性［7］。骨桥蛋白（0TO）能通过磷酸化使 IL-10不降，之后通过氨基端与整合素受体结合使IL-12升高，而启动Thl 反应［8］。白介素-12 (Interleurin-12, IL-12)是由淋巴细胞、单核细胞等 抗原提呈细胞分泌的两条链组成的异源二聚体的糖蛋白，它能增强Thl应 答及抑制Th2应答，可增加血清屮的IL-18、IL-15等的浓度和NK细胞与 LAK细胞的活性，从而发挥抗病毒作用［912］。然而，反过来IL-18亦能增强 NK细胞和CTL的细胞毒性活性［13］。白介素-18 (IL-18)是由单核吞噬细胞、 T细胞、NK细胞等分泌的Thl型细胞因子，是免疫调节的重要细胞因子， TL-18可促进T细胞增殖，诱导调节Thl细胞的分化成熟和Thl细胞为主 的细胞免疫反应；并增强T细胞、NK细胞Fasl的表达，从而促进FasFasl 系统介导的细胞毒效应，故在炎症反应中起着“双刃剑”的作用［1415］。大 多数研究报告示肝炎患者发生并发症及病情加重是因为骨桥蛋A在肝炎的 进展过程中起促进作用所致。 近年来细胞因子的表达水平在慢性肝炎以及肝硬化的发生、发展中越 来越受到重视。故本文通过应用ELISA方法检测15例健康献血者与62例 HBV相关性肝脏疾病患者的外周血中骨桥蛋白(OPN),白介素12(IL-12) 及白介素-18 (IL-18)的水平，观察并分析其表达水平在HBV相关性肝脏 疾病及其临床意义。 第二章材料与方法 2.1材料与对象 病例选择：收集在延边大学附属医院2011年1月到2012年12月，门诊 以及住院的乙型肝炎、肝硬化以及肝癌等肝脏疾病患者的血清。分为21 例单纯肝炎组（男性为13例，女性为8例），其年龄范围是19到62岁（年 龄平均为34.8）; 21例乙型肝炎肝硬化组（男性为14例，女性为7例）， 其年龄范围是26到73岁（年龄平均问