散斑竹根七地组织培养与快速繁殖体系地建立.docVIP

散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立-农学论文 散斑竹根七的组织培养与快速繁殖体系的建立 蒋天仪１，唐 敏１，阳 淑１，王 波２，石大兴３ （１．成都农业科技职业学院，成都 ６１１１３０；２．四川工程职业技术学院，四川 德阳 ６１８０００； ３．四川农业大学林学院，四川 雅安 ６２５０１４） 摘要：以散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓ ａｓｐｅｒａ （Ｈｕａ） Ｅｎｇｌ．ｅｘ Ｋｒａｕｓｅ］的嫩茎段作为外植体，研究了其组织培养和快速繁殖体系。结果表明，外植体预处理后，经过７５％的乙醇消毒２０ ｓ，再用０．１％ ＨｇＣｌ２处理６ ｍｉｎ的灭菌效果最好，启动率达到７８．４0％，污染率仅为２３．７５％。初代培养最适宜的培养基是ＭＳ＋ ６－ＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ＋２，４－Ｄ ０．０１ ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ ０．１ ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ １．０ ｍｇ／Ｌ；ＭＳ＋ ６－ＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋ＫＴ １．５ ｍｇ／Ｌ ＋ＮＡＡ ０．２ ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ １．０ ｍｇ／Ｌ适用于继代增殖培养，丛生芽的增殖系数达到６．１0；适宜生根的培养基为ＮＡＡ １．０ ｍｇ／Ｌ＋ＩＢＡ ０．５ ｍｇ／Ｌ＋１／２ＭＳ，生根率达到９６．１３％。 关键词 ：散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓ ａｓｐｅｒａ （Ｈｕａ） Ｅｎｇｌ．ｅｘ Ｋｒａｕｓｅ］；组织培养；快速繁殖体系 中图分类号：Q943.1 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）16－4070-03 DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.16.062 收稿日期：２０１５－０３－２５ 基金项目：四川省重点学科建设项目（ＳＺＤ０４１９） 作者简介：蒋天仪（１９８２－），女，四川成都人，讲师，硕士，主要从事观赏园艺植物的研究，（电话）０２８电子信箱ｑｑ．ｃｏｍ。 散斑竹根七［Ｄｉｓｐｏｒｏｐｓｉｓ ａｓｐｅｒａ （Ｈｕａ） Ｅｎｇｌ．ｅｘ Ｋｒａｕｓｅ］是百合科竹根七属植物，为多年生草本［１］，其叶厚纸质，花黄绿色，具紫色斑点，花被钟状［２］，春季开花，花朵俯垂，枝形优美。该种原产于林下、阴蔽山谷或溪边，是一种耐阴性很好的植物，可应用于风景林地下或建筑边缘物作地被植物，也可盆栽观赏［３］。地被植物在园林中的应用量一般很大，快速繁殖是满足园林应用的一个方面，而工厂化生产是保证苗木整齐的另一个方面。目前，工厂化生产种苗的公司并不多，专业生产地被植物的更少［４，５］。 １ 材料与方法 １．１ 试验材料 散斑竹根七植株采自四川省雅安市的周边山上，采回后种植于苗圃，选在５月取材，剪取３～４ ｃｍ的带芽茎段作为外植体。 １．２ 试验方法 １．２．１ 外植体表面灭菌 将外植体在加有洗衣粉的洗涤液中浸泡１０ ｍｉｎ，接着用自来水冲洗２～３次，然后放入７５％乙醇中处理２０ ｓ后用无菌水冲洗３次，再用０．１％ ＨｇＣｌ２溶液分别处理３、６和９ ｍｉｎ，期间不停地振荡，最后使用无菌水冲洗５次。每处理接种２０个外植体，重复３次，灭菌后的外植体接入启动培养基先暗培养７ ｄ，再进行光照培养（１２ ｈ/ｄ），３５ ｄ后统计启动率和污染率。 １．２．２ 初代培养 将处理好的带芽嫩茎段作为外植体进行接种，基本培养基为ＭＳ。设置基本培养基ＭＳ，加入６－ＢＡ（０、０．５、１．０、２．０ ｍｇ／Ｌ）、２，４－Ｄ（０．０１、０．０５、０．１、０．５ ｍｇ／Ｌ）、ＮＡＡ（０、０．０５、０．１、０．５ ｍｇ／Ｌ）和ＩＡＡ（ ０、０．１、０．５、１．０ ｍｇ／Ｌ），共１６个处理。每处理接种１０株外植体，重复３次，培养３０ ｄ观察统计芽启动率。 １．２．３ 继代增殖培养 将初代培养获得的茎段丛生芽切割为带１个芽的小块，转接到继代增殖培养基上，以ＭＳ为基本培养基，加入６－ＢＡ（０．５、１．０、２．０ ｍｇ／Ｌ）、ＫＴ（０．５、１．０、１．５ ｍｇ／Ｌ）、ＮＡＡ（０．０１、０．１、０．２ ｍｇ／Ｌ）和ＩＢＡ（０．１、０．５、１．０ ｍｇ／Ｌ），共１２个处理。每个处理接种２０株外植体，重复３次，４０ ｄ后统计增殖系数及有效苗数。 １．２．４ 生根培养 在增殖培养中选取高约３ ｃｍ的健壮丛生芽，切割成单苗，接种于生根培养基中，基本培养基为ＭＳ，加入ＮＡＡ（０．１、０．５、１．０ ｍｇ／Ｌ）、ＩＢＡ（０．０５、０．１、０．５ ｍｇ／Ｌ）和ＭＳ培养基（ＭＳ、１／２ＭＳ、１／４ＭＳ），共９个处理。每个处理接种２０株外植体，重复３次，４０ ｄ后观察统计生根率。 ２ 结果与分析 ２．１ 不同表面灭菌方式对灭菌效果的影响