试验十简单染色法.PDF

  微 生 物 實 習 報 告 班級： 組別： 學號： 姓名：     實 驗 十 簡 單 染 色 法   97 學年度第 1 學期微生物實驗  2008/ /   一 實驗目的  於染色過程中，僅使用一種染料者稱為簡單染色法。染料結合於 細胞之分子如蛋白或細胞膜的磷酸根之能力，依帶電發色團離子 與欲染色之細胞成分所攜帶之電荷 (electrical charge) 而定。 細菌細胞膜的磷酸根含有大量的陰電荷而包圍於細菌細胞的 外圈，故能與鹽基性染料的發色團離子 (帶陽電荷 ) 結合而使 細菌細胞著色，使細菌細胞與周圍的介質顏色鮮明利於觀察。 二 前言 由於細菌是透明之微小生物，同時其細胞質的密度與外面介質的 密度相似，故無法以肉眼觀察，必須在顯微鏡下才可看到。 事實上，顯微鏡下的細菌仍很微小， 一般多以染料使其著色， 以便觀察。本實驗主要讓同學們以簡單染色法觀察細菌的外形， 同時熟練顯微鏡的操作。  分子吸收可視區光譜而呈現的顏色之量和強度與分子結構 有關。早期化學家嘗試瞭解顏色與構造的關係時，注意到某特定 基存在於分子中，幾乎常會發出顏色 。這些基團通常為不飽和 親電子性的結構，通常稱為發色團 (Chromophore-S) 。如果 分子中含些可供給電子的基與發色團共同存在時，可增強顏色為 更鮮明，此基團稱為助色團 (Auxochrome-S) 。助色團通常為 酸性或鹽基性物質，並與發色圓 形成共輒系統的結構。一種 有機化合物使用為染料時，除了發色團與助色團外尚需第三基的 存在。這些第三基為可使有機化合物變成更易溶於水的鈉鹽、 鉀鹽、鈣鹽、銨鹽或氯鹽及硫酸鹽。 3     97 學年度第 1 學期微生物實驗  2008/ /   1. 酸性染料 (Acidic dye)：酸性染料為帶色酸類之鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、 或銨鹽，經解離可產生帶負電荷之發色團離子及鈉、鉀、鈣、或 銨等之陽離子者。酸性染料，即經解離後，發色閻部分為顯示負 電荷 [呈陰離子 (anion)] ，因此對細胞之陽電荷組成具高度 親和力 (amnity) 。如蛋白為攜陽電荷之細胞成分，與酸性染料 陰離子相遇時，立即與發色團之負電荷結合而著色。 2. 鹽基性染料 (Ba