辣木叶蛋白超声辅助盐提取工艺初步的研究.docVIP

辣木叶蛋白超声辅助盐提取工艺初步的研究 　　摘要：以辣木叶粉为原料，采用超声盐提的方法提取辣木蛋白质，以超声时间、提取液浓度、提取温度、提取液pH作为考查因素，通过单因素试验和组合试验来研究其辣木蛋白质得率的影响。结果表明：影响粗蛋白得率的因素依次为pH提取液浓度超声时间提取温度；最佳提取工艺条件为超声破碎30 min，提取温度60℃，提取液为0.7%氯化钠溶液，pH 11.0，粗蛋白得率为10.28%。 　　关键词：超声提取 辣木叶 植物蛋白 　　辣木 　　（Moringa oleifera Lam]是辣木科（Mofingace）辣木属（Moringa Adans）14个种中栽培最广泛的一个。辣木叶和种子中均含有丰富的矿物元素、纤维、油、蛋白质、维生素、氨基酸和甾醇等。20世纪90年代以来，我国开始从印度、缅甸、非洲等地引进辣木，并在干热河谷地区如云南的元江、红河等地试种成功，目前在广东、海南、福建等地都有栽培。随着栽培规模的扩大，侧重于辣木的产品开发研究也日渐增多，如辣木茶、辣木叶粉、辣木糕点等，但针对于辣木功能性成分的研究和开发相对较少。Anwar等分析了野生辣木种子各组分的质量分数分别为油质34.80%、蛋白质26.50%～32.00%、纤维7.54%、水分8.90%和灰分6.53%；段琼芬等对辣木种子中的主要化学成分进行了分析测定，结果显示种子各主要成分含量为粗蛋白37.00%、油34.00%、水分5.80%、淀粉6.10%、单宁3.03%、可溶性总糖17.10%、蔗糖2.80%、还原糖8.45%、粗纤维2.90%、灰分3.48%、游离脂肪酸8.00%；刘昌芬等研究发现在辣木叶干粉中每100 g就含有27.1 g的粗蛋白，2003mg钙，368 mg镁，204 mg磷，1324 mg钾，0.60mg铜，282 mg铁以及163 mg维生素A。从这些研究报道中均可以看出辣木蛋白含量较为丰富，蛋白含量在27%～37%，与含蛋白量较多的大豆相近，因而具有一定的研究意义和开发价值。拟研究以辣木叶粉为原料，采用超声辅助提取法，通过盐溶液提取辣木叶蛋白，并通过对超声提取时间、提取温度、盐溶液浓度和pH值4个因素对蛋白质提取影响的研究，确定较优的提取工艺条件，为辣木在食品和药用领域的应用提供一些理论依据。 　　1材料与方法 　　1.1试验材料和试剂 　　辣木叶采自广西亚热带作物研究所花卉中心，置于55℃烘箱，48 h后取出粉碎，过40目筛备用；牛血清蛋白（上海源叶）；考马斯亮蓝G250。 　　1.2仪器设备 　　JJ1000型电子天平，常熟市双杰测试仪器厂；DHG-9240A型电热恒温干燥箱，上海精宏实验设备有限公司；KBS-250型超声波细胞粉碎机，江苏昆山市超声仪器有限公司；3-30 K高速冷冻离心机，德国Sigma；T6型紫外可见分光光度计，北京普析通用仪器有限公司。 　　1.3试验方法 　　1.3.1粗蛋白的提取方法 　　准确称取制备好的辣木叶干粉1.00 g置于250mL烧杯中，加入100 mL（料液比1：100）的氯化钠溶液，在磁力搅拌器上搅拌复水30 min，超声破碎一定时间后，置于水浴锅中浸提1 h，浸提结束后经-幔速滤纸抽滤，滤液再经过离心机5000 r/min冷冻离心20 min，上清液即为含辣木粗蛋白的提取液，收集上清液至棕色瓶中4℃冷藏备用。 　　1.3.2影响蛋白质得率的单因素试验 　　1.3.2.1超声破碎时间对蛋白质得率的影响 　　在浸提温度60℃、0.5%NaCl溶液、pH8.0条件下，分别设置破碎时间15、20、25、30、35min，按照1.3.1中的方法进行提取试验，探讨超声时间对辣木蛋白得率的影响。 　　1.3.2.2浸提温度对蛋白质得率的影响 　　在超声破碎时间20 min、0.5%NaCl溶液、pH8.0条件下，控制浸提温度分别为40、50、60、70、80℃，按照1.3.1中的方法进行提取试验，探讨温度对辣木蛋白得率的影响。 　　1.3.2.3 NaCl溶液浓度对蛋白质得率的影响 　　在超声破碎时间20 min、浸提温度60℃、pH8.0条件下，分别配制不同的提取液浓度0.3%、0.5%、0.7%、0.9%、1.1%，按照1.3.1中的方法进行提取试验，探讨盐溶液浓度对辣木蛋白得率的影响。 　　1.3.2.4 NaCl溶液pH值对蛋白质得率的影响 　　在超声破碎时间20 min、浸提温度60℃、0.5%NaCl溶液条件下，分别调节提取液的pH8.0、9.0、10.0、11.0、12.0，按照1.3.1中的方法进行提取试验，探讨pH值对辣木蛋白得率的影响。 　　1.3.3最佳提取试验 　　通过单因素试验对辣木蛋白的得率影响结果，从各个因素中