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青蒿素提取工艺的研究 　　摘 要：采用单因素和均匀试验设计，应用高效液相色谱仪测定不同提取条件下青蒿素的提取量。结果表明，对青蒿素转移率的影响相对程度由大到小依次为：提取次数提取时间溶剂用量提取温度，确定了较佳的工艺操作条件为温度55℃时，取药材提取3次，第1次加药材投料量6倍量的溶剂油提取2h，第2次加5倍量提取1.5h，第3次加4倍量提取1.5h。 　　关键词：青蒿素；提取工艺；溶剂油 　　中图分类号：R284文献标识码：A文章编号：1673-2197（2009）02-0037-02 　　 　　青蒿为菊科植物黄花蒿（Artemisia annua L.）的干燥地上部分［1］，青蒿素（Artemisinin，C15H22O5）是从青蒿中提取分离得到的一种无色结晶。青蒿素为无色针状结晶，易溶于丙酮、乙酸乙酯，在乙醇、乙醚中溶解，微溶于冷石油醚，几乎不溶于水［2］。对热不稳定，易受潮、热和还原性质的影响而分解［3］。青蒿素是继氯喹、乙氨嘧啶、伯喹和磺胺后最热门的抗疟特效药，尤其对脑型疟疾和抗氯喹疟疾具有速效和低毒的特点，已成为世界卫生组织推荐的药品。青蒿素在原植物青蒿中含量很低，一般只有7‰左右，因此，研究青蒿素的提取率，缩短提取时间，降低生产成本具有重要的意义。本试验采用单因素和多因素试验研究了提取次数、提取时间、提取温度和提取溶剂量对提取的影响，确定了最佳提取条件，提取所得滤液经减压浓缩，除去杂质，重结晶，干燥精制后得青蒿素试验成品。 　　 　　1 材料和方法 　　 　　1.1 材料 　　6号溶剂油（上海炼油厂，产品质量执行标准：GB16629-1999）；120号溶剂油(中国石油化工总公司，产品质量执行标准：SH0004-90)；青蒿叶末（产地重庆酉阳，40℃时烘3h后打碎）；HPLC（HP公司）；青蒿素对照品（中国药品生物制品检定所）。 　　1.2 色谱条件［4］ 　　HP1100液相色谱仪，示差检测器，色谱柱KromasilKR100－C18 E17580（250×4.6mm），甲醇-水（72:28）为流动相；流速为1.0mL/min，柱温为30℃。分别精密吸取青蒿素对照品溶液与供试品溶液各20μL，注入液相色谱仪，测定。 　　1.3 提取溶剂 　　称取青蒿叶粗粉4份，每份100g，分别置1000mL圆底烧瓶中，其中2份每次加5倍量的6号溶剂油，另2份每次加5倍量的120号溶剂油，50℃提取3次，每次2h，分别合并3次提取液。 　　1.4 提取方法［5］ 　　提取方法主要有冷浸提取、回流提取、索氏提取、超声波提取和温浸提取等方法，按照下述试验操作进行提取方法考察： 　　（1）冷浸提取：称取青蒿叶粗粉100g，置1000mL分液漏斗中，每次用5倍量的6号溶剂油冷浸提取3次，每次24h，合并提取液。 　　（2）回流提取：称取青蒿叶粗粉100g，置1000mL圆底瓶中，每次用5倍量的6号溶剂油回流提取3次，每次2h，合并提取液。 　　（3）索氏提取：称取青蒿叶粗粉100g，置索氏提取器中，用10倍量的6号溶剂油进行提取至虹吸下的溶剂近无色，收集提取液。 　　（4）超声波提取：称取青蒿素叶粗粉100g，每次加入5倍量的6号溶剂油用超声波（200w）提取3次，每次30min，合并提取液。 　　（5）温浸提取：称取青蒿素叶粗粉100g，加入5倍量的6号溶剂油，温浸提取3次，温度为55℃，第一次保温2h，第二、三次保温1.5h，合并提取液。 　　1.5 均匀设计试验 　　为了取得更佳的提取效果，在初步选定溶剂种类和提取方法之后，对影响提取效果的诸因素：提取次数、溶剂用量、提取时间以及提取温度等进行了均匀设计考察。取药材粗粉9份，每份100g，按表3所示，在相应的实验条件下进行提取并进行测试。 　　1.6 考核指标 　　以有效成分青蒿素的转移率为指标对提取工艺的优劣进行考核。 　　转移率=提取液中青蒿素的含量×提取液总体积药材中青蒿素的总量 　　2 结果与讨论 　　（1）文献资料中［3，6，7］提取青蒿素的溶剂为溶剂油；青蒿素在溶剂油中有较高的溶解度，而青蒿中的杂质较少被同时提出；故提取溶剂选择为溶剂油。 　　（2）由表1可知，以6号溶剂油的转移率略高，并且在价格上6号油比120号便宜，因此选用6号溶剂油作为提取青蒿素的溶剂。 　　（3）由表2可知，五种提取方法所得的青蒿素的转移率以第3种和第5种较高；但第3种索氏提取耗时较长，故暂不选用此法；第5种温浸提取法操作简单，因此选用第5种方法进行提取。有报道用超临界提取，但经预算其成本较高，未采用。 　　 　　（4）均匀设计试验得回归方程为y=62.114+6.105A+9.68*10-2B+0.999C-8.5*10-2D