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长寿花叶片离体快繁技术的研究 　　摘要 以长寿花幼嫩叶片为外植体，研究不同灭菌时间对长寿花幼嫩叶片再生能力的影响以及不同激素配比对愈伤组织诱导、不定芽诱导和生根诱导的影响。结果表明：长寿花幼嫩叶片最佳的灭菌方式为75%酒精消毒30 s，无菌水冲洗4次，再用0.1%升汞消毒7 min，无菌水冲洗5次；愈伤组织诱导的最适培养基配方为MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L；不定芽诱导分化的最适培养基配方为MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；不定芽诱导生根的最适培养基配方为1/2 MS+IBA 0.2 mg/L。 　　关键词 长寿花；嫩叶片；组织培养；快速繁殖 　　中图分类号 S682.035.3 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2016）07-0143-02 　　Abstract The research using explant from seeding leaf of Kalanchoe blossfeldiana，the regeneration ability of the leaf was tested under different duration of sterilization，and the effects of different hormones combination on the induction of callus、adventitious buds and roots of Kalanchoe blossfeldiana.The results showed that the best way of sterilization was sterilizing the leaf in 75% ethanol for 30 seconds，washing 4 times with disinfection water，then in 0.1% mercury bichloride for 7 minutes and washing with disfection water for 5 times；the optimum medium for the induction of leaves was MS+6-BA 0.5 mg/L+2，4-D 0.2 mg/L；the suitable culture medium for bud differentiation and proliferation was MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L；the optimum rooting medium was 1/2 MS+IBA 0.2 mg/L. 　　Key words Kalanchoe blossfeldiana；seedling leaf；tissue culture；rapid propagation 　　长寿花（Kalanchoe blossfeldiana），又叫矮生伽蓝菜、寿星花、假川莲，是景天科（Crassulaceae）伽蓝菜属（Kalanchoe）多年生肉质草本植物[1]。长寿花原产自马达加斯加岛，其花色鲜艳，花期长，观赏效果极佳，20世纪90年代初传入我国，近年随着进口花卉大量的进入中国市场，成为了一种极具发展潜力的“新品种花卉”[2]。 　　长寿花因其耐干旱、花期长、花色鲜艳、易栽培等特点在市场上深受消费者喜爱，是国际花卉市场发展最快的室内盆栽花卉之一。其繁殖方法一般是播种和扦插，但这2种方法都易受季节影响。笔者以长寿花叶片为外植体，以MS为基本培养基，研究不同激素配比对长寿花愈伤组织生长、不定芽诱导以及生根效果的影响，以期得到各培养阶段的最佳培养基配方，为国内长寿花组培苗工厂化生产提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 试验材料 　　健康的市售盆栽长寿花幼嫩叶片。 　　1.2 培养基及培养条件 　　1.2.1 培养基制备。基本培养基为MS或1/2 MS，各培养基蔗糖浓度为3%，琼脂成分为0.7%，pH值为5.8，121 ℃高压灭菌20 min[3-8]。 　　1.2.2 培养条件。温度23～26 ℃，光照时间12 h/d，光照强度1 000 lx左右培养[9-13]。 　　1.3 试验方法 　　1.3.1 外植体灭菌。取长寿花健康幼嫩的叶片，用流水冲洗10 min，移至超净工作台内操作，用75%乙醇对叶片进行消毒，无菌水冲洗4次，0.1%升汞消毒，无菌水冲洗5次。将灭菌后的叶片切成约0.5 cm×0.5 cm的小块接种在诱导愈伤培养基中，每瓶放置5小块，每个处理水平接种6瓶，即每个水平共接种30块外植体，置于培养室中培养，每天观测1次并记录，对不同消毒时长