水稻染色质重塑因子ＣＨＲ７２９对激素代谢影响.docVIP

水稻染色质重塑因子ＣＨＲ７２９对激素代谢的影响-农学论文 水稻染色质重塑因子ＣＨＲ７２９对激素代谢的影响 李健健 （华中农业大学生命科学技术学院，武汉 ４３００７０） 摘要：ＣＨＲ７２９是水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）ＣＨＤ３类染色质重塑因子，广泛参与水稻生长发育进程，并影响全基因组明显表达和组蛋白修饰，测定了多种植物内源激素在ｃｈｒ７２９突变体中的含量，探讨了ＣＨＲ７２９与激素代谢之间的联系。结果表明，在苗期地上部分和成熟期剑叶中，ｃｈｒ７２９突变体内源生长素（ＩＡＡ），脱落酸（ＡＢＡ），茉莉酸（ＪＡ）含量明显降低，生长素合成以及ＡＢＡ合成基因的表达在ｃｈｒ７２９突变体中均呈下调表达。树脂切片结果显示，ｃｈｒ７２９突变体中茎秆成熟组织细胞明显变小，居间分生组织细胞大小无明显变化。苗期检测细胞分裂素氧化酶／脱氢酶（ＣＫＸ）基因表达发现，ｃｈｒ７２９突变体中ＣＫＸ１、ＣＫＸ２、ＣＫＸ４基因表达量升高，伴随一些位点组蛋白变体Ｈ２Ａ．Ｚ富集程度的上升，表明ＣＨＲ７２９可能抑制Ｈ２Ａ．Ｚ在基因组上的装载，广泛参与水稻激素代谢调控。 关键词 ：水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ L.）；染色质重塑因子；激素；干旱 中图分类号：Ｑ７５６ 文献标识码：A 文章编号：0439－８114（２０15）02－0468-06 DOI:10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.02.055 植物激素是植物合成产生的一类小分子化合物。截至目前，多种分子被认定为植物激素，包括生长素或吲哚乙酸（ＩＡＡ）、细胞分裂素、脱落酸（ＡＢＡ）、赤霉素、乙烯、油菜素甾醇、茉莉酸、水杨酸等，均对植物生长发育起着重要的调控作用。生长素调控植物向性运动、顶端优势、根的发生等一系列生理过程［１－３］。细胞分裂素参与顶端优势、茎分生组织形成、叶片衰老、营养物质的运输、种子萌发以及植物抗病应答等［４］。脱落酸调控种子休眠，并在植物非生物胁迫响应中发挥重要作用［５］。茉莉酸参与植物抗病，影响植物发育［６］。在不同的环境条件下，植物激素含量是高度动态的。 真核生物的遗传物质存在于染色质中，染色质是经多级组装形成的高度动态的结构。染色质的不同状态，影响转录机器对ＤＮＡ序列的接近与识别。染色质结构的动态变化主要受到两类复合物调控，一类是组蛋白共价修饰酶类；另一类是ＡＴＰ依赖的染色质重塑复合物。ＳＷＩ２／ＳＮＦ２家族的ＡＴＰ酶是染色质重塑复合物的核心成员，其通过水解ＡＴＰ释放能量，驱动染色质构象发生改变，增加或者降低ＤＮＡ结合蛋白对ＤＮＡ序列的可接近程度，进而调控基因的表达［７］。拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）中一些ＳＷＩ２／ＳＮＦ２家族成员已被鉴定参与调控拟南芥生长发育的多个进程。ＣＨＤ３类染色质重塑因子ＰＩＣＫＬＥ（ＰＫＬ）参与拟南芥种子萌发，主根和侧根的发育，根分生组织活性以及心皮的分化［８－１５］；另一个染色质重塑因子ＢＲＡＨＭＡ（ＢＲＭ）调控拟南芥茎和叶片的发育以及开花等过程［１６－１９］。此外，ＰＫＬ和ＢＲＭ也与多种激素调控相关，如生长素、细胞分裂素、脱落酸等［１２，２０－２３］。 水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ）的染色质重塑因子ＣＨＲ７２９也已被鉴定出来，ＣＨＲ７２９功能缺失造成水稻多种生长缺陷，例如植株矮小、近轴面叶片白化、开花期推迟等［５，２４］。ＣＨＲ７２９基因缺失影响全基因组水平大量基因的表达和组蛋白修饰［２４］。然而，ＣＨＲ７２９是否影响激素代谢仍不清楚，本研究通过测定多种内源植物激素的含量，发现ＩＡＡ、ＡＢＡ、ＪＡ含量在ｃｈｒ７２９突变体中显著降低，激素代谢相关基因的表达也受到ＣＨＲ７２９功能突变的影响，ＣＨＲ７２９影响水稻多种激素代谢。 １ 材料与方法 １．１ 材料 本试验使用的亚洲栽培稻粳稻品种分别为中花１１（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｊａｐｏｎｉｃａ ｃｖ． Ｚｈｏｎｇｈｕａ １１），ＨＹ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｊａｐｏｎｉｃａ ｃｖ． Ｈｗａｙｏｕｎｇ）和ＳＳＢＭ（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ． ｓｕｂｓｐ． ｊａｐｏｎｉｃａ ｃｖ． Ｉｓｈｉｋａｒｉ－ｓｈｉｒｏｇｅ）。ＣＨＲ７２９基因的两个等位突变体分别为Ｔ－ＤＮＡ插入突变体ｃｈｒ７２９，背景为ＨＹ，ＥＭＳ诱变突变体ｏｓｃｈｒ４，背景为ＳＳＢＭ。 １．２ 幼苗处理 １）ＣＨＲ７２９表达模式验证时，正常成长的野生型中花１１在不同生长时期进行取样并诱导愈伤取样，取样部位包括愈伤、幼苗、叶片、剑叶、茎和穗子。 ２）聚乙二醇和脱落酸处理试验时，将在生根培养基上无菌状态下发芽１３ ｄ的幼苗移出无菌环境炼苗１ ｄ后，分别用２