miR-124通过靶向BECN1基因调控细胞自噬抑制食管癌KYSE170细胞.PDF

中国肿瘤生物治疗杂志 ·778 · Chin J Cancer Biother, Aug. 2018, Vol. 25, No. 8 DOI：：10.3872/j.issn.1007-385x.2018.08.005 ∙基础研究∙ miR-124 通过靶向BECN1 基因调控细胞自噬抑制食管癌KYSE170 细胞 的侵袭和迁移 刘飞，刘思桦，刘世娜，谷丽娜，孟令娇，尹丹静，张建东，吴云艳，桑梅香(河北医科大学第四医院科研中心，河 北 石家庄 050011) [摘 要] 目的：探讨miR- 124通过调控细胞自噬对食管癌KYSE 170细胞侵袭和迁移能力的影响。方法：食管癌KYSE 170细 胞转染miR- 124 mimic ，Transwell 实验检测细胞侵袭和迁移能力的变化，双荧光素酶报告基因验证miR- 124对BECN1(Beclin1)基 因的靶向调控作用，Western blotting 分析对BECN 1、P62 及LC3 蛋白表达水平的影响。向KYSE 170细胞中转染BECN1 siRNA 沉 默BECN1 的表达，Transwell 法检测细胞侵袭及迁移能力的变化，Western blotting 检测BECN 1、P62 及LC3 蛋白的表达。将miR- 124 mimic 与BECN1 过表达质粒共转染至KYSE 170细胞，Transwell 实验检测细胞侵袭及迁移能力的变化，Western blotting 检测 自噬相关基因表达的变化。结果：转染miR- 124 mimic 后，KYSE 170细胞的侵袭和迁移能力下降(P0.05) ，BECN 1 蛋白及荧光 素酶报告基因活性均明显下调(均P0.01) ，自噬相关蛋白P62 表达增高，LC3 表达水平明显降低(均P0.01) 。沉默BECN1 表达抑 制食管癌细胞侵袭及迁移(P0.01) ，而过表达BECN1 使miR- 124 mimic 对KYSE 170细胞自噬、侵袭和迁移能力的抑制作用明显 减弱(P0.01) ，自噬相关蛋白P62 表达降低、LC3 蛋白表达水平明显升高(均P0.01) 。结论：miR- 124 能够抑制食管癌细胞侵袭及 迁移能力，其机制可能与靶向调控自噬相关基因BECN1 的表达影响细胞自噬有关。 [关键词] miR- 124；BECN1 ；食管癌；KYSE 170细胞；自噬；迁移；侵袭 [中图分类号] R730.51 ；R735.1 [文献标识码] A [文章编号] 1007-385X （2018 ）08-0778-07 miR-124 regulates autophagy to inhibit invasion and migration of esophageal can- cer KYSE170 cells by targeting BECN1 LIU Fei, LIU Sihua, LIU Shina, GU Lina, MENG Lingjiao, YIN Danjing, ZHANG Jiandong, WU Yunyan, SANG Meixiang (Scientific Research Center, the Fourth Hospital of Hebei Medical University, Shijiazhuang 050017, Hebei, China) [Abstract] Objective: To investigate the effect of miR- 124 on the invasion and migration of esophageal cancer KYSE170 cells by regulating autophagy. Methods: miR- 124 mimic was transfected into esophageal cancer KYSE170 cells. Transwell assay was used to detect the change of invasion and migration ability of cells. Dua