细胞色素c在EastmanAQ聚离子薄膜电极上的直接电化学.docVIP

2002 年 　8 月 第 38 卷 　第 4 期 北京师范大学学报(自然科学版) Journal of Beijing Normal University (Natural Science) Aug. 2002 Vol . 38 　No. 4 细胞色素 c 在 Ea stman AQ聚离子薄膜 电极上的直接电化学3 陈小乐 　胡乃非 　曾泳淮 (北京师范大学化学系 , 100875 , 北京 ∥第一作者 28 岁 ,女 ,硕士) 摘要 　将聚磺酸酯 Eastman AQ38 (AQ) 与细胞色素 c ( Cyt c) 的混合水分散系涂布于热解石墨电 极表面 ,晾干后可形成 Cyt c2AQ 薄膜. 在 pH 7. 6 的缓冲溶液中 ,Cyt c2AQ 薄膜电极表现出良好的直 接电化学行为 ,电化学活性中心为血红素 Fe( Ⅲ) / 血红素 Fe( Ⅱ) 氧化还原对. Cyt c2AQ 薄膜在 - 0. 05 V(vs SCE) 处的一对可逆的循环伏安还原氧化峰随浸泡时间的延长而逐渐降低 ,而在 - 0. 40 V 的另一对峰逐渐增高 ,表明 Cyt c 在 AQ 薄膜中很可能经历了由其原始构象向另一种新构象的转 变 ,后者在 AQ 薄膜中十分稳定. 对其伏安行为进行了较详尽的研究 ,并估计了体系的电化学参数 , 如表观异相电子传递速率常数 ks和式量电位 E°′等. Cyt c2AQ 薄膜电极可催化还原溶液中的氧. 关键词 　细胞色素 c ; 聚磺酸酯 ; 直接电化学 ; 电化学催化 分类号 　O 657. 1 ; O 657. 14 细胞色素 c ( Cyt c) 是一种氧化还原蛋白质 ,其氧化还原中心为一个由多肽链包围的血红 素辅基. 由于其在生命体内担负着电子传递的功能 , Cyt c 是研究生命过程中电子转移的理想 模型物之一. 通常 ,溶液中的 Cyt c 很难在裸的固体电极上表现出良好的电化学活性 ,而某些修 饰于电极表面的表面活性剂或聚合物等薄膜体系可以为 Cyt c 提供与水溶液不同的微环境 ,从 而使 Cyt c 与电极之间的直接电子交换成为可能. 聚磺酸酯 Ea stman AQ (AQ) 具有疏水的聚合物骨架和亲水的磺酸根基团 ,是一种两亲的阴 离子聚合物 ,也是继 Nafion 之后的又一种可作为良好成膜材料的聚离子 ,在修饰电极上得到广 泛应用. Bianco[1 ]曾利用修饰于热解石墨 ( PG) 电极上的 AQ 聚离子薄膜 ,将 Cyt c 从其溶液中 吸入到薄膜中去 ,从而获得了 Cyt c 准可逆的循环伏安图. 本文首次用涂布法实现了 Cyt c2AQ 薄膜电极的制备 ,获得了其良好的直接电化学信号 ,并 详细地研究了 Cyt c 在 AQ 薄膜中的电化学行为. 1 　实验部分 1. 1 　试剂与仪器 　马心 Cyt c 购自 Sigma ;AQ ( Mr = 14 000 , tg = 38 ℃) 购自 Ea stman Chemical ; 实验中主要使用 0. 01 mol·L - 1三羟甲基氨基甲烷2HCl ( Tris) 作为缓冲溶液 ;其他试剂均为分析 纯 ;用水为二次蒸馏水. 各种电化学测量采用 CHI 660 型电化学工作站 (CH Instruments) ;电池 为三电极体系 :饱和甘汞电极( SCE) 为参比电极 ,铂丝为对电极 ,涂布在 PG上的薄膜电极为工 作电极 ,高纯氮除氧并在测试中保持氮气氛 ,实验温度为(18 ± 2) ℃. 3 国家自然科学基金资助项目 收稿日期 :2002203213 ? 1994-2009 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. 　5　16 北京师范大学学报(自然科学版) 第 38 卷 　 1. 2 　薄膜的制备 　用微量注射器将 3μL φ= 1 %的 AQ 水分散系均匀涂布到新磨光的 PG (Union Carbide) 电极表面(面积 0. 28 cm2) ,套上小试管 ,待水分缓慢蒸发后即得到 AQ 薄膜. Cyt c2AQ 薄膜则是将 10μL 体积比为 7∶3的 1. 14 × 10 - 4 mol·L - 1 Cyt c 与φ= 1 % AQ 水分散系的混 合液涂布到 PG电极上 ,罩上小试管静置晾干. 扫描电子显微镜 ( SEM) 测得 AQ 和 Cyt c2AQ 干 薄膜的平均厚度约为 3～4μm. 2 　结果和讨论 2. 1 　循环伏安法 　当把 Cyt c2AQ 薄膜电极置于 pH 7. 6 的空白缓冲溶液中后 ,可以观察到 2 对循环伏安( CV) 峰 ,分别在 - 0. 05 和