光亲和配体的应用有助于麻醉药机制的研究-麻醉学文献进展分享平台.PDFVIP

光亲和配体的应用有助于麻醉药机制的研究 宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院，*宾夕法尼亚州费城的麻醉学和重症护理 和药理学系; ‡宾夕法尼亚大学化学系，宾夕法尼亚州费城艺术与科学学院; 和 Rutgers 大学物理系，新泽西州卡姆登。接受出版物 2016 年 3 月 22 日。资金： 国立卫生研究院（GM055876，GM107117 ）; 国家科学基金会研究生研究奖学 金（DGE-1321851 ）。作者声明没有利益冲突。作者不会提供版本。地址信件 Roderic G. Eckenhoff ，MD ，宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院，麻醉学和重症监 护部， 311A John Morgan Bldg ，3620 Hamilton Walk ，Philadelphia ，PA 请发送电子邮件至 roderic.eckenhoff@uphs.upenn.edu 。 摘要 麻醉光亲和配体越来越多地出现在麻醉研究领域。这些配体模仿母体全身 麻醉药，并允许研究者研究麻醉药与受体和酶的相互作用；确定特异性目标， 并确定在生物系统内的分布。到目前为止，几乎所有的用于医药上的全身麻醉 药都有其相应的光亲和配体可以在文献里查阅到。在这篇综述中，我们研究了 目前的方法，包括配体的设计，表征和部署的所有方面。最后，我们给出了光 亲和配体在此领域出现的关键思考点，并强调其未来的美好前景。 研究全身麻醉药之间的相互作用和它们的大分子靶点对于理解这些药物的 生物化学是至关重要的。 在近年来，光亲和标记应用于此目的增加了。 传统 上，这种方法的目的在于允许研究人员识别已建立的目标（微水平）内的结合 位点，且在较小程度上，在给定的生物系统（宏观层面）确定新的结合分子分 布。在麻醉研究中，随着光亲和配体的发展（PAL ）有一个显着的进展，从最 初使用纯的氟烷 1 到络合物合成允许基于亲和力的双功能 PAL 蛋白质分析.2 这 篇综述的主要目的是描述当前的技术特征和讨论麻醉药 PAL 目标鉴定的应用和 结果。 光亲和配体 在目前的光亲和标记过程中，目标药物（母体配体）的化学结构被修饰以 掺入光反应性基团，其在紫外线（UV ）照射下产生高度反应性的化学中间体。 然后该中间体通过共价插入到紧密接近的键，例如溶剂组分或占据的大分子来 实现其化学上的 “加合”或 “标记”。在结合到大分子的PAL 的实例中，配体 加合物作为可追踪的修饰，其可用于研究配体靶向相互作用和/或配体在器官或 组织内的分布。 PAL 提供给全身麻醉剂的关键优点是它们减轻相对较低的亲 和力，通常为微摩尔，与此特定类别的药物相关。它们通过显着延长药物解偶 联速率来实现，从而提供这些其它暂时相互作用的不可逆快照。相反，麻醉剂 的固有的高解离常数仍然是实验的障碍，主要是通过增加难以验证的光亲和标 记研究中的特异性结合位点。这些概念和当前用于验证麻醉剂特异性位点的方 法将在随后的评论中讨论。以下部分涉及麻醉剂 PAL 的初始设计和物理化学表 征，均有助于解释麻醉药的光亲和标记结果。 麻醉光亲和配体 设计 在设计麻醉药 PAL 期间考虑了几个因素;最引人注目的是，将光反应性基 团引入麻醉药物化学结构中且这样并不显着改变母体药物的生物化学和药理学 性质。二氮丙啶几乎是通用的，作为掺入麻醉药 PAL 中的光反应性基团（图 1）。使用UV 照射，二氮烯类发生光活化，导致惰性四氧二氮分子的释放和不 加选择地插入最近分子中的碳烯化学物质中。这种特定光反应性基团的普及主 要归因于光活化所需的较小破坏性 UV 波长、其相对稳定性和较小尺寸以及高 反应性中间产物碳烯。在结合中，与亲本麻醉剂相比,这些属性产生较少的结合 性质偏差。我们指导感兴趣的读者对以前的评论做进一步详细讨论其发展和使 用 PALs 和光反应性基团。3-6 在实践中，PAL 的有效模拟全身麻醉药物的设计和合成可以说是最困难的 过程，因为有挑战性的合成稳定含有光反应性基团的分子和缺乏对麻醉剂和它 们的重要大分子靶标之间的分子识别元件的深入了解。 大多数全身麻醉剂的小 尺寸和相对无特征的性质使得任何化学修饰，甚至二氮丙啶，相对大的扰动。 因为它是，即使最好设计的PAL 需要相当多的化学品偏离母体麻醉结构（除了 氟烷 1）和单独的不能确定地确定母体药物的结合目标和/或位点。 理化性质 在将二氮丙啶并入麻醉药物化学结构后，所产生的物理化学