枯草杆菌BacillussubtilisBS-99-H之iturinA抗菌物质-美和科技大学.PDF

Plant Pathology Bulletin 19: 225-233, 20 10 枯草桿菌Bacillus subtilis BS-99-H 之iturin A 抗菌物質對蓮霧果腐病原菌 Pestalotiopsis eugeniae 之生物活性 1 2 3, 4 林秀芬　陳滄海　劉顯達 1 屏東科技大學生物資源研究所 2 屏東科技大學植物醫學系 3 美和科技大學健康與生技產業研究所 4 聯絡作者 ，電子郵件 ：x0007@.tw ；傳真 ：＋886-8-7789-837 摘　要 林秀芬、陳滄海 、劉顯達. 20 10. 枯草桿菌Bacillus subtilis BS-99-H 之iturin A 抗菌物質對蓮霧果 腐病原菌Pestalotiop sis eugeniae 之生物活性. 植病會刊19: 225-233. 從玻璃紙抗生法的研究顯示 ，令枯草桿菌 (Bacillus subtilis) BS-99-H 之瓊脂塊放在玻璃紙 上 ，再置於培養基平板上培養 1-4 天 ，去除含有枯草桿菌玻璃紙之培養基經 90℃ 加熱 10 分 鐘及未經加熱處理 ，皆對蓮霧果腐病原菌 (Pestalotiop sis eugeniae) 的菌絲生長有相同的抑制效 果 ，至培養第 5 天之後 ，對P. eugeniae 菌絲生長的抑制率達 100% 。由上述具有拮抗作用之培 養基中萃取可能的抗菌物質 ，經HPLC 及串聯式質譜儀 (MS/MS) 分析得知其為iturin A 抗生物 質 。另將部分純化iturin A 與P. eugeniae 菌絲混合處理後 ，發現菌體細胞導電度於 8 小時後顯 著增加3.4 倍 ，至28 小時達到高峰 ，為5.3 倍 ；以顯微鏡觀察P. eugeniae 菌絲呈現異常膨脹與 扭曲。BS-99-H 所產生的iturin A 抑制P. eugeniae 孢子發芽之IC50 為0.51 mg/ml ，當iturin A 濃 度為≥0.84 mg/ml 則完全抑制P. eugeniae 孢子發芽與菌絲生長。從本研究結果顯示出BS-99-H 產生的iturin A 是抑制P. eugeniae 很重要的因子 ，在發展對P. eugeniae 之生物防治上將可扮演 重要的角色 ，因此本研究所得的枯草桿菌BS-99-H 未來具有潛力開發作為蓮霧果腐病害之生物 性殺菌劑 。 關鍵詞 ：枯草桿菌BS-99-H 、蓮霧果腐病原菌、iturin A 緒　言 菌性的物質 ，而抗生物質的產生在病害生物防治上扮 演著重要的角色 。實際上 ，桿菌屬不同種類的細菌會 蓮霧 (Syzygium samarangense Merrill et Perry) 為 分泌胜 (peptides) 和脂胜 (lipopeptides) 之抗真菌性 肽 肽 國內重要熱帶果樹之一 ，以屏東縣為最大產地 。蓮霧 的物質 ，例如 fungicine 、iturin 、bacillomicine 等到培 果實在套袋栽培制度下 ，果實也常發生炭疽病 、果腐 養基中來抑制許多的真菌 ，如Asp e