紫外分光光度法与紫外分光光度计选购.pptVIP

紫外分光光度法与紫外分光光度计的选购 主要内容 紫外可见光谱法应用及其发展 用好紫外可见分光光度计 紫外可见光分光光度计的选购体会 一、紫外可见光谱法应用及其发展 UV-VIS波长范围 190-400nm 紫外区 400-750nm 可见区 750-1100 nm 近红外区 吸收光谱来源 吸收光度法：当一束连续光源通过单色器，被分解为各个波长单色光，单色光通过样品后被选择性吸收，用光检测器给予记录不被吸收的透过光，形成的图像就是吸收光谱 选择性吸收 物质对光的吸收是选择性的，利用被测物质对某波长的光的吸收来了解物质的特性，这就是光谱法的基础。 有机化合物的紫外—可见吸收光谱是三种电子跃迁的结果：σ电子、π电子、n电子。 峰型及强度 最大吸收波长 峰宽 强度 吸收光谱强度 I0＝Ｉa + It + Ir T%（透射率）＝It/I0×100% A=-lgT 定量基础——比尔定律 A（λ）＝ - lgT =ε（λ）×L×C ε：摩尔吸光系数，是物质对特定波长光吸收能力的量度，其物理意义是1mol单位浓度1cm单位光程时的吸光度。 L：光程 C：浓度 成立条件： 单色光、澄清的稀溶液 K 由于共轭性吸收带，起因与多烯、烯酮等 B 由于苯（环）性，起因于芳香族、杂芳香族化合物，有时候尚能显示精细结构 R由于自由基性吸收、起因于CO、NO2等发色基团 紫外可见分光光度计的主要应用 （1）定性分析（参加） 　 （2）结构分析（参加） （3）纯度检查　 例如： CCl4中有无CS2 ，只要看318nm处的吸收峰； 乙醇中是否含苯，只要看256nm的强吸收峰 （4）定量分析（Beer定律，主要应用） 例如： Cr6+测定； 水中氨氮测定、土壤有效硼、维生素C…… （5）动力学分析 例如： 测定反应速度常数、测定催化效率、酶催化…… UV-VIS的应用及其最新进展 新发展之一——应用领域不断扩大药品检验、医疗卫生、化学化工、环保、地质、冶金、石油、食品、生命科学、材料科学、计量科学等科研、教学及生产中，使用最多、覆盖面最广的分析仪器。 新发展之二——许多分析方法衍生出专业的分析仪器：水质COD分析，水质总氮分析，全自动生化分析仪，膜厚分析仪，白度分析仪器，快速成像仪，农残快速分析仪、叶绿素分析仪、黑碳仪等等 新发展之三——新方法的应用 ——化学计量学的发展 （1）褶合光谱软件包（Convelution Spectrum） 第二军医大学 吴玉田教授。可以对样品不经过分离，直接应用紫外可见光度计分析含有6个不通组分的试样，这一发明，对药物分析工作来说，是一个重大突破，引起了国内外广泛注意。 （2）PE公司Quset软件包，与Lambda 9紫外可见分光光度计联用，可直接分析10个组分。 （3）高阶张量数据解析复杂黑白灰体系分析湖南大学 俞洳勤院士，。 （4）PLS、因子分析、遗传算法…… （5）导数光谱的应用 新发展之——多分析联用技术 生命物质等联用技术，HPLC DNA/蛋白质分析 流动注射分析 FIA联用 积分光度法的复兴——积分球应用、材料、太阳能谱、固体粉末表面性质研究，突破了以液体为分析对象的局限，极大的扩展了分析领域 紫外可见分光光度计的组成 （1）光源　 （2）单色器 （3）吸收池　 （4）检测器　 紫外可见分光光度计的分类 1. 单光束:一束单色光,一只比色皿,一只光电转换器 优点:结构简单,价格便宜 缺点:光度准确度等主要技术指标比较差,故分析误差较大.(因杂散光,光源波动,电子学的噪声等都不能抵消) 注:一般要求较高的制药行业、检验行业、科研等行业不适宜。 2. 准双光束:二束光，只有一只比色皿。其中，一束光通过比色皿，另一束光不通过比色皿（这束光主要起抵消光源波动对分析误差影响的作用） 优点:结构较简单,价格较便宜，光度准确度等指标较单光束仪器好。 3. 双光束：二束光，二只比色皿，一只或二只光电转换器（以一只光电转换器常见）如1810D系列和19系列 优点:光度准确度等主要技术指标好,分析准确度高 缺点:结构复杂，价格较贵。——主流技术 4.双波长：采用两个单色器 优点：主要适用于试样的多组分测量。——已经很少见 单光束 仪器新进展  近十年来，紫外/可见分光技术变化不大，始终没有革命性的突破。然而，随着光学设计、电子技术和软件的进步，使得仪器的复杂性降低，可靠性和分析效能提高，这些都说明传统仪器也在不断发展。 高性能新器件的发展，例如氙灯光源、CCD/PDA检测器、光纤探头附件 目前国际上的高档紫外仪器：