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抗生物质第1节微生物学的试験法通则水试薬等并びに器具
第 9 章 抗生物質
第 1 節 微生物学的試験法通則
水、試薬等並びに器具類は必要に応 じ、滅菌 したものを用いる。
1 平板法
A 試薬等の調製
1) 緩衝液
緩衝液は、次に掲げる方法により調製 し、12 1 °C で 15 分間高圧蒸気滅菌する。
なお、pH の調整 を要す る場合には、 リン酸 (1 mol/L)又は水酸化カ リウム溶液
(1 mol/L)を用いて行 う。
i) 1 号緩衝液 (pH 4.5)
リン酸二水素カ リウム 13.6 g を量って水 750 mL に溶かし、pH を4.4~4.6 に調
整 した後、更に水を加 えて 1,000 mL とする。
ii) 2 号緩衝液 (pH 6.0)
リン酸二水素カ リウム 3.5 g
リン酸水素二ナ トリウム ・12 水 3 g
上記分量を量って水 750 mL に溶かし、pH を 5.9~6.1 に調整 した後、更に水を
加えて 1,000 mL とする。
iii) 3 号緩衝液 (pH 6.0)
リン酸二水素カ リウム 7 g
リン酸水素二ナ トリウム ・12 水 6 g
上記分量を量って水 750 mL に溶かし、pH を 5.9~6.1 に調整 した後、更に水を
加えて 1,000 mL とする。
iv) 4 号緩衝液 (pH 8.0)
リン酸二水素カ リウム 13.3 g を量って水 750 mL に溶かし、水酸化カ リウム溶
液 (1 mol/L)100 mL 程度を加 えて pH を 7.9~8.1 に調整 した後、更に水を加えて
1,000 mL とする。
v) 5 号緩衝液 (pH 6.0)
リン酸二水素カ リウム 80 g
リン酸水素二カ リウム 20 g
上記分量を量って水 750 mL に溶かし、pH を 5.9~6.1 に調整 した後、更に水を
加えて 1,000 mL とする。
vi) 6 号緩衝液 (pH 8.0)
リン酸二水素カ リウム 13.3 g
塩化ナ トリウム 100 g
上記分量を量って水 750 mL に溶かし、水酸化カ リウム溶液 (1 mol/L)100 mL
程度を加えて pH を 7.9~8.1 に調整 した後、更に水を加 えて 1,000 mL とする。
vii) 7 号緩衝液 (pH 7.0)
リン酸二水素カ リウム 6.4 g
リン酸水素二ナ トリウム ・12 水 18.9 g
上記分量を量って水 750 mL に溶かし、pH を 6.9~7.1 に調整 した後、更に水を
465
加えて 1,000 mL とする。
viii) 8 号緩衝液 (pH 4.0)
乳酸 7.5 mL を量って水 750 mL に溶かし、水酸化ナ トリウム溶液 (1 mol/L)
50 mL 程度を加えて pH を 3.9~4.1 に調整 した後、更に水を加えて 1,000 mL とす
る。
ix) 9 号緩衝液 (pH 8.0)
リン酸二水素カ リウム 0.5 g
リン酸水素二カ リウム 16.7 g
炭酸水素ナ トリウム 20 g
上記分量を量って水 750
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