蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的-生物技术通报.PDFVIP

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2018-11-16 发布于天津
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蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的-生物技术通报.PDF

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蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的-生物技术通报

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN ( ) 2016, 32 7 :138-145 蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白的基因克隆及在大肠杆菌中的异源表达和功能分析刘畅罗著张梦如杨玉梅刘娴龚明邹竹荣（云南师范大学生命科学学院云南省生物质能源和环境生物技术重点实验室教育部生物质能源持续发展和应用工程研究中心，昆明 650500） 1 摘要：旨在体内证明蓝藻橙色类胡萝卜素蛋白（OCP）具备不依赖类胡萝卜素的单线态氧（O2 ）清除功能。通过PCR 扩增蓝藻OCP 基因，对其进行原核诱导表达，并通过细菌点板和生长曲线测定法检验它在大肠杆菌中的抗1O2 活性。结果表明，直接从蓝藻水体提取的宏基因组中成功扩增得到OCP 基因，其编码区大小为954 bp。生物信息学分析表明，来源于主 SyOCP SyOCP 要蓝藻种类——集胞藻（ sp. PCC 6803）。经IPTG 诱导，基因在大肠杆菌中获得了高水平的可溶性表达。另外， Synechocystis SyOCP 异源表达SyOCP 的重组大肠杆菌对常见的1O2 光敏诱发剂染料——亚甲基蓝的耐受性得到了显著增强。蓝藻OCP（不结合类胡萝卜素）内在的抗1O2 功能在大肠杆菌中得到了体内验证。关键词：蓝藻；橙色胡萝卜素蛋白；宏基因组；单线态氧；亚甲基蓝 DOI ：10.13560/ki.biotech.bull.1985.2016.07.021 Gene Cloning of the Orange Carotenoid Protein from Cyanobacteria ， and Its Ectopic Expression and Functional Evaluation in Escherichia coli LIU Chang LUO Zhu ZHANG Meng-ru YANG Yu-mei LIU Xian GONG Ming ZOU Zhu-rong （Engineering Research Center of Sustainable Development and Utilization of Biomass Energy （Ministry of Education ），Key Laboratory of Biomass Energy and Environmental Biotechnology of Yunnan Province ，School of Life Sciences ，