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博士论文 局部用辣椒碱传递体的研究 博士研究生：龙晓英 指导教师：罗佳波、谢培山 摘要 frutescens 目的：辣椒碱是从茄科植物辣椒Capsicum L．的果实中分离 的辛辣物质 辣椒素的主要成分。辣椒素在辣椒中的含量为0．1％～1％，其中有 五种组成物的含量之和己接近100％，包括辣椒碱约69％，二氢辣椒碱约22％，降 二氢辣椒碱约7％，高■氢辣椒碱约1％。 在医学上，辣椒碱显示了广泛的生理活性，包括抗高血压、降血脂。局部 应用辣椒碱也可以治疗各种疾病，例如风湿性关节炎、骨关节炎、肌肉疼痛、 背痛、撞伤、拉伤、扭伤，以及糖尿病性神经痛、带状泡疹后遗神经痛、二又 神经痛、过敏性鼻炎、牛度癣等。辣椒碱止痛的作用机理土要是耗竭神经介质P 物质。由于P物质被耗蝎，神经元变得迟钝，对外周伤害性刺激脱敏。神经元脱 敏是辣椒碱治疗作用的基础。 但由于辣椒高度的肝首过效应及非常短的半衰期，经皮给药能绕过肝脏及维 持平稳的血约浓度，是辣椒碱发挥全身及局部作用合适的给药系统。目前，市 场上辣椒碱局部产品，包括霜剂、贴片及橡皮膏剂，均在应用部位有明显灼痛 感，导致皮肤红斑。同时，皮肤角质层对药物的透皮吸收具有阻碍作用，因此， 消除辣椒碱的不良反应并保留其功效是研究开发辣椒碱临床应用的主要目标。 ， 目前，提高药物透过皮肤角质层的方法包括微粒载体(泡囊、微乳、类脂毫 微粒等)．化学促进剂(氮酮、挥发油等)，物理促渗技术(离子导入、电穿孔、 超声波等)。其中，各种泡囊载体以其毒性小、不对皮肤造成伤害，促进各种性 辣椒碱传递体 质药物(脂溶性、水溶性、大分子)穿过皮肤角质层而各受注目。新型泡囊一一 传递体(transfersomes)具有高度变形与弹性，能穿过比其自身小数倍的孔道， 比传统腊质体有更高的皮肤渗透性已得到广泛的认同。 本文采用传递体(transfersomes)包裹辣椒碱以减少局部应用带来毒副反应， 同时，增加透皮作用。内容包括辣椒碱的提取、分离与纯化．辣椒碱传递体制 各，动物、人体皮肤体内外渗透性及药效学评价。 方法：(1)辣椒碱提取分离与纯化。以河北定州王为原料，70％醇， 回流提取2次，每次2h提取辣椒碱类化合物及辣椒色素，并采用HPLC法测定其 辣椒碱类含量。乙醇提取液减压浓缩成浸膏，用2％NaOH溶液溶解，控制溶液 5rain)，分离上清液。用石油醚自上清液中萃取辣 的pH为11，离心(2000rpm，1 椒色素。残留的碱水液中加)k10％HCI，调节溶液的phi3，加入乙酸乙酯萃取 辣椒碱类化合物。以硅胶G为层析材料，洗脱剂为石油醚及丙酮(3：1)，分离 辣椒碱及二氢辣椒碱。再经反向硅胶柱层析，以洗脱剂为甲醇及水(7：3)分 离辣椒碱。 (2)辣椒碱传递体的制备及结构大小、包封率测定。采用薄膜分散法、薄 膜一高压匀质法及滴入一高剪切分散法制各辣椒碱传递体，透射电镜及zetasizer激 光光子粒度仪测定传递体结构及大小，葡聚糖G50微型凝胶测定包封率，并对操 作条件，包括影响包封与未包封药物分离的因素，即微柱中水量、离心转速及 时间等的影响进行了研究。葡聚糖充分溶胀后填．A．5ml注射剂针筒中制成微柱， 4ml辣椒碱传递体 离心(1000rpm，6s)，除去葡聚糖凝胶微柱中部分水分，将0 滴加到柱中以后，离心(2000rpm，5rain)，分离包封及未包封棘椒碱，一阶导 数法扣除背景干扰测定辣椒碱传递体包封率。以包封率的改变、聚集及颜色为 指标，考查辣椒碱传递体在4。c，250c，37。C，相对湿度75％，贮存6个月的稳定 性。 (3)辣椒碱传递体释放度与体外皮肤渗透性。辣椒碱从传递体的释放速度 用Franz扩散池测定。以50％乙醇一生理盐水为接受液，供药池一侧加入含辣椒碱