聚乙二醇修饰重组人干扰素ω的药代动力学-研究.pdf

Master’s Degree Dissertation of Chongqing University Study on Pharmacokinetics of Recombinant Human IFN-ω Modified with PEG Master’s Degree Candidate:Kuang Yu Supervisor: Prof. Wang Bochu Major: Pharmic Chemistry College of Bioengineering Chongqing University April 2007 摘 要 本论文以与企业合作开发的聚乙二醇修饰重组人干扰素 ω （PEG-rhIFN-ω）为 研究对象，初步探讨 PEG-rhIFN-ω 在体内的药代动力学和组织分布，以期掌握 PEG-rhIFN-ω 在体内的动态变化规律，为临床安全用药和合理用药提供依据和参 考。论文以小鼠作为实验材料，通过静脉注射重组人干扰素 ω （rhIFN-ω）和 PEG-rhIFN-ω，采用ELISA 双抗体夹心法（Double antibody sandwich, DAS-ELISA ） 从血药浓度－时间关系和组织分布角度分析聚乙二醇（polyethyleneglycol, PEG ） 修饰对 rhIFN-ω药代动力学的影响，获得了主要的结论如下： ① 制备了 rhIFN-ω抗体和辣根过氧化物酶（HRP ）标记rhIFN-ω抗体，建立 了测定小鼠体内rhIFN-ω和 PEG-rhIFN-ω 的血药浓度及组织中浓度的ELISA 双抗 体夹心法。 ② 采用 ELISA 双抗体夹心法研究了小鼠经静脉注射 PEG-rhIFN-ω和 rhIFN-ω 3 个剂量（5µg/kg、3µg/kg、1µg/kg）后的血药浓度－时间曲线，并应用房室模型 方法对 rhIFN-ω 和 PEG-rhIFN-ω 的药代动力学参数进行估算，结果表明 rhIFN-ω 和 PEG-rhIFN-ω在小鼠的体内过程均符合一级消除动力学的二房室模型。rhIFN-ω 的消除半衰期（t1/2 β）为0.866 ±0.18h，PEG-rhIFN-ω为 2.86 ±0.27h，是rhIFN-ω 的 3.30 倍。rhIFN-ω 的消除速率常数 β，消除率 CL，中央室向体外消除速率常数 k10 和表观分布容积 Vd 分别为 0.799h-1 ，0.416mL/h·kg ，4.38h-1 ，和 9.81L/kg ， -1 -1 PEG-rhIFN-ω为 0.244h ，0.492mL/h·kg ，1.40h 和 11.80L/kg，说明 PEG 修饰能够 明显延长rhIFN-ω 的生物半衰期（t1/2 ）。 ③ 采用 ELISA 双抗体夹心法测定了小鼠经静脉注射 rhIFN-ω和 PEG-rhIFN-ω 5µg/kg 后不同时间段肝、脾、肾、心、肺、胃和膀胱等重要组织中的浓度，结果 显示除了肾脏和心以外，PEG-rhIFN-ω在其他各组织中的分布比 rhIFN-ω高，PEG 修饰可以提高 rhIFN-ω 在组织中的利用率，PEG 修饰可以明显改变 rhIFN-ω 在体 内的分布比例，特别是 PEG-rhIFN-ω 在肝脏的分布增加，说明具有较强的组织针 对性。 关键词：rhIFN-ω，PEG-rhIFN-ω，ELISA ，药代动力学，组织分布 I ABSTRACT The thesis focuses on the development of PEG-rhIFN-ω, discusses the pharmacokinetics and concentration distribution in