esfatin1对脑干孤束核葡萄糖敏感神经元电活动影响　.docVIP

esfatin?!对脑干孤束核葡萄糖敏感神 经元电活动影响 】目的观察nesfatin? 1对脑干孤束核葡萄糖 敏感神经元电活动影响，探讨其抑制摄食作用的可能机制。 方法采用全细胞膜片钳技术，在电流钳下，记录nesfatin? 1对孤束核葡萄糖敏感神经元电活动的影响。结果在孤束核 中共记录到30个神经元，给予葡萄糖（5mmol/L）灌流后， 有18个（60。0%）对葡萄糖有反应，其中13个放电频率 升高（G? EXC，t=2o 509，P 关键词】nesfat in ? 1;孤 束核;神经元;葡萄糖;膜片钳术 [ABSTR ACT]Ob ject iveToob ser vetheeff ec tsofnesfa t in? longluc ose ? sensiti veneuronsin nucleustra c tussolita ri us （NTS）, and explore thep ossibl emech an ism sofNTS inco ntrolli ngf oodintak e。 MethodsWh o le ? cellpat ch ? clamptec hniquewasus edtorecord t hedischar ge sofNTSin due edbynes fati n? ladm inist ratio n。Resu ItsT hirtyNT Sne uronswer et reatedwit h glucose, of whichl8 (60。 0%) responde dtoglucose w ithl3asgl uc ose? exci ted (G? EXC) neur onsand fivea sgluc ose ? in hibi ted (G ? I NH) neurons。 Th eotherl2s h owednoresp onse。 Nesfat in? ladminis tration (10 n mol/L) inc re asedthef iri ngrates of12 G? EXCn euron s （12/13） （t=3。 34 6， P［KEY WOR DS］nesfa ti n? l;solit a rynucleus: neurons:glu cose;patch? clamptechn i que nes fat in? 1是由日本群马大学森昌朋教授等于201 7 年发现的摄食调节肽［1］，大鼠脑室内注射n esf atin? 1 能抑制摄食，nesfati n ? 1通过雅片？促黑色素细胞皮质 素原（POM C）途径发挥抑制摄食的作用。我们以前研究了 I、II型糖尿病病人空腹血浆nesfati n? 1的水平，结果 显示I型糖尿病病人空腹血浆nes fatin ? 1水平略高于正 常人，但差异无统计学意义；II型糖尿病病人空腹血浆 nesfati n ? 1水平则均明显低于正常人和I型糖尿病病人 ［2］。脑干孤束核（NTS）含有葡萄糖敏感神经元［3］，其中 包括葡萄糖兴奋型神经元（G? EXC）和葡萄糖抑制型神经 元（G? INH）。许多研究证明，NTS葡萄糖敏感神经元参与 摄食的调控。最近，MAEJ IM A等［4］报道第三脑室注射 nesfati n? 1诱发的c? Fos的表达主要位于室旁核和NTS。 这种选择性的c ? Fos表达，提示除室旁核之外，NTS也是 n esfatin ? 1抑制摄食的重要靶点之一。本实验采用全细 胞膜片钳技术，通过观察nesfa tin ? 1对NTS葡萄糖敏感 神经元的放电活动的影响，探讨nesfa tin? 1在脑干NTS 抑制摄食的可能机制。 1材料和方法 1。1实验材料 出生1 4d的健康SD大鼠，体质量30?40g，雌雄各半， 由青岛市药检所提供。记录电极所用硬质玻璃毛坯由S U TTERINSTRU MENTC0 （北京总代理）提供，氯化钠（Na Cl）、 氯化钾（KC 1 ）、氯化钙（CaC 12 ）、硫酸镁（Mg S04 ）、碳 酸氢钠（NaHC03）、磷酸二氢钠（NaH2P0 4）均系AM RESC 0公司产品，葡萄糖（Glucose）、葡萄糖酸钾（K? gl u conate）、四乙酸（EGTA）、疑乙基昵嗪磺酸（Hepes）、 GTP、Na2? ATP均为Sigma公司产品。 1。2溶液的配制 按文献［8 ］方法配制细胞外液和内液。细胞外液（即人 工脑脊液，AC SF）的成分为：124 mm ol/LNaCl，3 mmol/LKCl， 1。 3mmol/LNa H2P04, 26mmo l/LNaHC03, 5 mmol/LHep es , 2mmol/L CaC 12，lmm