2018届高三生物二轮复习专题-基因工程含PCR技术和细胞工程专题能力提升练.docVIP

PAGE PAGE 11 专题15　现代生物科技专题 第1讲　基因工程(含PCR技术)和细胞工程 (30分钟　100分) 1.(11分)(2017·成都二模)根据基因工程的有关知识,回答下列问题:　世纪金榜导学(1)限制酶切割DNA分子后产生的片段,其末端类型有____________和____________。 (2)质粒运载体用EcoRⅠ切割后产生的片段如下: AATTC……G G……CTTAA 为使运载体与目的基因相连,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,还可用另一种限制酶切割,该酶必 须具有的特点是___________________________________________________。 (3)按其来源不同,基因工程中所使用的DNA连接酶有两类,即____________DNA连接酶和____________DNA连接酶。 (4)反转录作用的模板是____________,产物是____________。若要在体外获得大量反转录产物,常采用____________技术。 (5)基因工程中除质粒外,____________和____________也可作为运载体。 (6)若用重组质粒转化大肠杆菌,一般情况下,不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞,原因是________________________________________________。 【解析】(1)DNA分子经过限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式——黏性末端和平末端。(2)载体若可与目的基因连接,则载体与目的基因应有相同的黏性末端,所以切割目的基因的酶切割产生的DNA片段末端应与EcoRⅠ切割产生的黏性末端相同。(3)根据DNA连接酶来源的不同可以把其分为两类,一类来源于大肠杆菌,叫做E·coliDNA连接酶;另一类来源于T4噬菌体,叫做T4DNA连接酶。(4)反转录是以RNA为模板,在反转录酶的催化作用下合成DNA的过程,是DNA生物合成的一种特殊方式。PCR技术是常见的扩增DNA的技术。(5)基因工程的载体包括动植物病毒、λ噬菌体的衍生物和质粒等。(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱,不能作为基因工程的受体细胞,应先采用Ca2+处理大肠杆菌,使其成为感受态的细胞。 答案:(1)平末端　黏性末端　(2)切割产生的DNA片段末端与EcoRⅠ切割产生的相同　(3)T4　E·coli　(4)mRNA　单链DNA　PCR(聚合酶链式反应)　(5)动植物病毒　λ噬菌体的衍生物　(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱 2.(12分)(2017·长沙二模)利用小鼠制备的抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体做成的“早早孕试剂盒”,检测早孕的准确率在90%以上。请回答该“单抗”制备的有关问题: (1)在该“单抗”的生产过程中,将____________作为抗原对小鼠进行注射。 (2)从小鼠体内脾脏中得到了____________细胞,设法将鼠的骨髓瘤细胞与该细胞融合,再用特定的____________培养基进行筛选,选出融合的杂种细胞,对该细胞还需进行____________培养和____________检测,经多次筛选,就可获得足够数量的符合需要的杂交瘤细胞,该细胞的特点是___。 (3)若在体外大规模培养该杂交瘤细胞,需要采取一定的措施保证被培养的细胞处于____________的环境中,例如向培养液中加入一定量的抗生素等;为保证营养,在使用____________培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。需提供____________(气体),维持培养液的pH。 (4)单克隆抗体最广泛的用途是用作____________。 【解析】(1)生产抗人绒毛促性腺激素单克隆抗体,需要将人绒毛促性腺激素作为抗原对小鼠进行注射,使小鼠最终可以产生特异性抗体的B淋巴细胞。(2)生产单克隆抗体需要融合B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,可以从小鼠脾脏中获得B淋巴细胞。B淋巴细胞和骨髓瘤细胞诱导融合,要用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞。筛选出的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和专一抗体检测,经过多次筛选,最终获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞既能迅速大量繁殖,也能产生单克隆抗体。(3)动物细胞培养的条件是无菌无毒,营养物质用合成培养基,同时添加动物血清或血浆。气体条件是氧气和二氧化碳,其中二氧化碳能维持培养液的pH。(4)单克隆抗体的用途有作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物,其中最广泛的用途是用作诊断试剂。 答案:(1)人绒毛促性腺激素 (2)B淋巴　选择　克隆化　抗体　既能迅速大量繁殖,也能产生单克隆抗体(2分)　(3)无菌无毒　合成　CO2　(4)体外诊断试剂(2分) 3.