《山药转基因初步探索论文》-毕业论文.docVIP

lw 分类号： 西安文理学院专业设计论文 山药转基因初步探索 系 院 名 称 生命科学系 指 导 老 师 学 生 姓 名 学 生 学 号 10101080103 专 业 班 级 生物科学08级1班 提 交 时 间 2012年1月 山药转基因初步探索 （西安文理学院 生命科学系，2008级生物科学1班 陕西 西安 710065） 摘要:　以山药的零余子长出的茎段为外植体, 在菌悬液中侵泡后，通过土壤农杆菌LBA4404进入茎段内，将外源基因整合到植物体内，使山药植株基因发生改变，从而提高品质和质量。 关键词　山药　茎段　组织培养　转基因 Bud formation of Dioscorea opposite seeds and stem segments Tao Xu (Department of Life Science ,Xian University of Arts and Science,Xian,Shaanxi, 710065) Abstract: The stem segments grown from the seeds of Dioscorea opposite were used as explants. They could form multiple-buds on MS+6-BA0.2～2mg／L + NAA0.2～1mg／L culture medium. The average bud amount was 2~4. The result showed that medium of MS＋6-BA2.0 mg∕L＋NAA0.5 mg∕L was the best for induction of buds from Dioscorea opposite explants, and for formation of regeneration plants. The plants grew strongly, which leaf color was darkgreen and viability was great. Key words: Dioscorea opposite segment tissue culture 前言 山药（Dioscorea opposite）又名薯蓣，属于薯蓣科薯蓣属的一种缠绕草本肉质块茎植物[1],以块茎和零余子入药,具有健脾、 补肺、 益肾的功能 ,主治肺虚咳嗽、 脾虚腹泻、 糖尿病等症 ,久服则耳聪目明 ,轻身不饥延年[2]，其产品畅销国内外[1]。山药的营养与药用价值都较高，随人民生活水平的提高，山药资源的发掘与利用越来越受到人们重视。山药在福建闽西的新罗、长汀、连城等地栽培历史悠久，但由于传统的薯块留种栽培方式导致病毒病的危害不断加重，造成种性退化和产量下降，影响了农民种植的积极性，从而制约了山药的产业化发展[3]。为此，我们研究山药的目是通过转入外源基因，提高山药的产量和品质。 1 材料与方法 1.1 供试材料 山药零余子（种子），利用零余子长出的植株取其幼嫩叶子和节间茎段为外植体。 1.2 试验方法 1.2.1 茎段的诱导萌发 将切成长3cm 的幼苗茎段，用70%酒精消毒30s，用无菌水漂洗，再用1%NaClO消毒10min，用无菌水漂洗5 次，分别接种于以下5个诱导成苗培养基处理。 （1）MS ＋6-BA 1.0mg/L ＋NAA 0.5mg/L，（2）MS ＋6-BA 2.0mg/L＋NAA 0.5mg/L，（3）MS ＋6-BA 0.2mg/L ＋NAA 0.2mg/L，（4）MS ＋6-BA 2mg/L ＋NAA 0.2mg/L （5） MS。观察统计茎段的成苗率、成苗时间等。 所用培养基均以MS为基本培养基，蔗糖 3%，琼脂0 . 8%， pH值为5 . 8，在 121 ℃、 1 . 1 Pa的高温高压下灭菌 20 min，培养温度为25 ±1℃，每日光照16h，强度2000Lx。 零余子诱导生芽。将零余子切成小块，用70%酒精消毒30s，用无菌水漂洗，再用1%HgCl2消毒10min，用无菌水漂洗5 次，分别接种于以下5个诱导成苗培养基处理： （1）MS （2）MS ＋6-BA 2.0 mg/L＋NAA 0.5 mg/L， 观察统计零余子的成苗率、成苗时间等。 叶片愈伤组织的诱导。将叶片切成0.5×0.5cm的小片，，用70%酒精消毒30s，用无菌水漂洗，再用1%NaClO消毒10min，用无菌水漂洗5 次，分别加入以下3个诱导愈伤的培养基