TMT000V00除菌过滤前溶液微生物限度检查标准操作规程.docVIP

职位 签名/日期 起草 QC检验员 审核 QC经理助理 审核 QA经理 批准 质量受权人 生效日期： 制作备份：4份；分发部门： 质量保证一部、质量保证二部、质量控制部办公室、质量控制部生测岗位 1、 目的 建立除菌过滤前药液微生物限度检查标准操作规程，使操作标准化，检验数据准确 化。 2、 适用范围 适用于除菌过滤前头孢呋辛酸溶液、头孢呋辛钠洗液、头孢呋辛钠混合溶媒、丙酮、 头孢地嗪溶液、头孢地嗪钠钠盐溶液、头孢呋辛钠钠盐A溶液、头孢西丁酸溶液、头孢 西丁钠钠盐溶液、盐酸头孢毗肟溶液以及乳糖溶液的微生物限度检验。 3、 依据及参考文件 SOP-QA-074《微生物负荷监测标准操作规程》 SOP-QC-0213《微生物限度检查法》 4、 职责 QC检验员: 按照此操作规程执行。 QC主管： 保证此操作规程的执行。 QC经理： 保证此操作规程的执行。 5、 内容 5.1取样方法 按《取样操作规程》取样。 5.2检验仪器及用具 洁净工作台脉动真空灭菌枳不锈钢铁桶 干热灭菌箱 冰箱生化培养箱 霉菌培养箱 薄膜过滤器洒精灯 洁净工作台 脉动真空灭菌枳 不锈钢铁桶 干热灭菌箱 冰箱 生化培养箱 霉菌培养箱 薄膜过滤器 洒精灯 量筒 平皿 刻度吸管 试管 蓝盖瓶 生物安全枳 0.45pm微孔滤膜 5.3试剂、试液 胰酪胨大豆琼脂培养基 pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液 头孢菌素酶 5.4检验方法 5.4.1标准规定：细菌、霉菌和酵母菌总数每100ml不得过lOcfu。 5.4.2检验方法： 5.4.2.1丙酮、头孢呋辛钠洗液、头孢呋辛钠混合溶媒的检验方法： 取本品50ml，加入450mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，同法制备2份。取制备 好供试液250ml过滤，滤干，再用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗（100ml/次，冲 洗3次），用薄膜过滤器滤干，将滤膜菌面朝上贴于胰酪胨大豆琼脂培养基平板上。同 法操作，共制备4张膜，在23?28°C培养3天，培养3天结束后，转移至30?35°C培 养2天。逐日点计菌数。备注：24h、48h、72h、96h、120h观察结果以相当于25ml溶 液（原液）计，结果项下以100ml溶液（原液）计。 阴性对照：取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液，不过滤供试液，其它操作同上，平行做2 皿，阴性对照不得长菌。 5.4.2.2头孢地嗪钠钠盐溶液、头孢呋辛钠钠盐A溶液、头孢西丁钠钠盐溶液的检验方法: 取溶液（原液）50ml，加入450mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，同法制备2份。 取制备好供试液250ml过滤，滤干，再用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液分次冲洗（100ml/ 次，冲洗7次），用薄膜过滤器滤干，将滤膜菌面朝上贴于胰酪胨大豆琼脂培养基平板 上。同法操作，共制备4张膜，在23?28°C培养3天，培养3天结束后，转移至30? 35°C培养2天。逐口点计菌数。备注：24h、48h、72h、96h、120h观察结果以相当于 25ml溶液（原液）计，结果项下以100ml药液（原液）计。 阴性对照：取pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液，不过滤供试液，其它操作同上，平行做2 皿，阴性对照不得长菌。 5.4.2.3头孢呋辛酸溶液和头孢西丁酸溶液的检验方法： 取溶液（原液）50ml，加入450mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，同法制备2份。 取制备好供试液250ml用薄膜过滤器过滤，滤干，再用pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液分次 标题：除菌过滤前溶液微生物限度检查标准操作规程 Title： Test Methodsr For Microorganism limit of Solutions 文件编号Document No.TM-OT-054-V00 文件编号Document No. TM-OT-054-V00 页码 替代 Supersedes 无 None Page before Sterile Filtration 3/6 冲洗（100ml/次，冲洗7次）,在最后100ml冲洗液中加入50万单位头孢菌素酶中和5min, 屮和后滤干，将滤膜菌面朝上贴于胰酪胨大豆琼脂培养棊平板上。同法操作，共制备4 张膜，在23?28°C培养3天，培养3天结束后，转移至30?35°C培养2天。逐日点计 菌数。备注：24h、48h、72h、96h、120h观察结果以和当于25ml溶液（原液）计，结 果项下以100ml溶液（原液）计。 阴性对照：取pH7.0氯化钠-蛋A胨缓冲液，不过滤供试液，其它操作同上，平行做2 皿，阴性对照不得长菌。 5.4.2.4头孢地嗪溶液的检验方法： 取溶液（原液）50ml,加入450mlpH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液中，混匀，同法制备2份。 取制备好供试液250ml过滤，滤干，再用