微生物遗传变异种选育.pptVIP

8. 1 微生物遗传变异的物质基础 1. 遗传和变异的物质基础 2. DNA的结构与复制 3. 遗传物质的存在形式 在原核生物中，复制起始点通常为一个，而在真核生物中则为多个。 几种代表性质粒： 1.F-因子（fertility factor） 致育因子/性因子，62×106Dalton，94.5kb，相当于核染色体DNA2%的环状双链DNA，足以编码94个中等大小多肽，其中1/3基因（tra区）与接合作用有关。 存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中，决定性别。 2.巨大质粒（mega质粒） 为近年来在Rhizobium（根瘤菌属）中发现的一种质粒，分子量为200~300×106Dalton，比一般质粒大几十倍到几百倍，故称巨大质粒，其上有一系列固氮基因。 3.Ti（毒性）质粒（tumoe inducing plasmid） 即诱癌质粒。长200kb，是一种大型质粒。 存在于根癌土壤杆菌（Agrobacterium tumefaciens）中。赋予宿主引起许多双子叶植物的根癌的特性。 Ti质粒已成为植物遗传工程研究中的重要载体。一些具有重要形状的外源基因可借DNA重组技术设法插入到Ti质粒中，并进一步使之整合到植物染色体上，以改变该植物的遗传性，达到培育植物优良品种的目的。 4.Col因子（colicinogenic factor） 产大肠杆菌素因子。大肠杆菌素是一种由E.coli的某些菌株所分泌的细菌蛋白，具有通过抑制复制、转录、转译或能量代谢等而专一地杀死不含Col因子的近缘的其它肠道细菌。 凡带Col因子的菌株，由于质粒本身编码一种免疫蛋白，从而对大肠杆菌素有免疫作用，不受其伤害。 有些G+细菌也产生细菌素，如用于食品保藏的Nisin ColE1研究得很多，并被广泛地用于重组DNA 的研究和用于体外复制系统上。 5.R（抗生素抗性和重金属抗性）因子（resistence factor） 最初发现于痢疾志贺氏菌（Shigella dysenteriae），后来发现还存在于Salmonella、Vibrio、Bacillus、Pseudomonas和Staphylococcus中。 R因子由相连的两个DNA片段组成，即抗性转移因子（resistence transfor factor， RTF ）和抗性决定因子（r-determinant），RTF控制质粒copy数及复制，抗性决定因子带有抗生素或重金属的抗性基因。 R-因子在细胞内的copy数可从1~2个到几十个，分为严紧型和松弛型两种，经氯霉素处理后，松弛型质粒可达2000~3000个/细胞。 6.降解性（代谢）质粒 如假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码，从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名，例如有分解CAM（樟脑）质粒，XYL（二甲苯）质粒，SAL（水杨酸）质粒，MDL（扁桃酸）质粒，，NAP（奈）质粒和TOL（甲苯）质粒等。 7.隐秘质粒 不显示任何表型效应，只能通过物理的方法检测的质粒。如酵母菌的2um质粒。 转座因子 插入序列（IS，insertion sequence) 分子量最小（仅0.7~1.4kb），只有引起转座的转座酶基因而不含其它基因，具有反向末端重复序列。已在染色体、F因子等质粒上发现IS序列。E . coli的F因子和核染色体组上有一些相同的IS，通过这些同源序列间的重组，就可使 F因子插入到E . coli的核染色体组上，形成Hfr菌株。因IS在染色体组上插入的位置和方向的不同，其引起的突变效应也不同。IS被切离时引起的突变可以回复，如果因切离部位有误而带走IS以外的一部分DNA序列，就会在插入部位造成缺失，从而发生新的突变。 转座子（Tn，transposon) 转座子又称转位子或易位子分子量居中（一般为2~25kb）。除了与转座作用有关的基因外，还含有抗性基因（对抗生素、某些毒物）、乳糖发酵基因等几个至十几个基因。从结构来看， Tn 有两种类型，即末端为反向或顺向重复的IS，或末端为反向重复的序列。Tn虽能插到受体DNA分子的许多位点上，但并不完全是随机的，某些区域更易插入。 Mu噬菌体（即 mutator phage） Mu噬菌体即 诱变噬菌体是E . coli的一种温和噬菌体。含有噬菌体生长繁殖和转座所必需的基因，其分子量最大（39kb），含有20多个基因，但并没有固定的整合位置。Mu噬菌体引起的转座可以引起插入突变，其中约有2%是营养缺陷型突变。 转座的遗传效应 插入突变 基因的移动和重排 极性效应 插入（IS）序列 转座子(Tn) 特殊病毒（Mu噬菌体） 定义：可在DNA链