《恰玛古中氨基酸的测定》-毕业论文.docVIP

PAGE 精品 恰玛古中氨基酸的测定 摘要：恰玛古中有人体必有的氨基酸。本文采用了分光光度法来测定伊宁，拜城县，柯坪县，焉耆县的恰玛古中氨基酸含量[1]。 丙氨酸作为标准溶液绘制出标准曲线，其回归方程为: Y=0.01024+1.28961X，R2=0.99831 0.01499<0.0001 mg/ml的范围内呈良好的线性关系。平均回收率为94.06%。用比色法查出丙氨酸与显色剂显色在570nm处测定吸光度。结果表明：伊宁恰玛古中氨基酸的含量最高，柯坪恰玛古氨基酸的含量最低。 关键词：恰玛古；氨基酸；分光度法；测定 前言 恰玛古(芜菁，Brassica campestris)一种草本是字花科植物，又称蔓箐、狗头芥、鸡毛菜等，维吾尔语称为“恰玛古”(音译)；药食两用，广泛分布在全国各地 [2]。《中国中草药大全》、《本草纲目》、《维吾尔药志》、《中华人民共和国卫生部药品标准、维吾尔药分册》等药典对恰玛古的植物来源、药材性状(包括块、根、叶、花和子)、化学成分、药理作用、功能主治、配方加工等都有详细记载。是肺身之佳品，具有清肺止咳，填精壮阳，明目增视等功效。据《大医典》记在长食恰玛古能“生发乌发，润喉顺气，填精壮肾，软肠通便，通利关节，治斑秃，喉燥气短，肾脏瘦弱，骨节不利等” [4]。 恰玛古是高碱性的植物，能平衡人体酸碱度。构成人体的最基本的物质，有蛋白质、脂类、碳水化合物、无机盐、维生素、水和食物纤维等。 作为构成蛋白质分子的基本单位的氨基酸，无疑是构成人体内最基本物质之一。 构成人体的氨基酸有20多种，它们是：色氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、缬氨酸、赖氨酸、组氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、丙氨酸、苯谷氨酸、乌氨酸等。这些氨基酸存在于自然界中，在植物体内都能合成，而人体不能全部合成。蛋白氨基酸作为蛋白质的组成成分，在人和动物的营养代谢和生理功能上发挥重要功能。恰麻姑中有丰富的氨基酸。本文用分光光度法测定恰麻姑中氨基酸，方法简单，具有产率高，速度快，耗资少等特点，因而具有广阔的研究和应用前景[3]。 1.实验部分 1.1实验原理： 1.茚三酮溶液与氨基酸共热，生成氨。氨与茚三酮和还原性茚三酮反应，最终为蓝色化合物。该化合物颜色的深浅与氨基酸的含量成正比。因此在比色法可以用茚三酮对氨基酸进行测定[6][7]。 1. 2仪器与试剂 1. 2. 1 主要仪器： 1分光光度计722S 型（上海第三分析仪器厂） 2.温水浴锅（山东鄄城华鲁公司）3.搅碎机（北京市永光明医疗仪器厂）4.电子天平（上海精科天平）5.长颈漏斗6.移液管 7.量筒8.烧杯9.滤纸10.温度计11.容量瓶12. 具塞试管。 1.2.2试剂 1.盐酸（分析纯）2.茚三酮（分析纯）3.乙二醇甲醚（分析纯）4.抗坏血酸（分析纯）5。丙氨酸（分析纯）6.乙醇（分析纯）7.柠檬酸（分析纯）8.氢氧化钠（分析纯）。 1.2.3试剂的配制 1.茚三酮乙二醇甲醚的制备：先制备还原性茚三酮，称去2.5克茚三酮，用65ml沸蒸馏水溶解，的黄色溶液，将5g抗坏血酸用250ml温蒸馏水解一边搅拌一边将抗坏血酸溶液滴加到茚三酮溶液中，不断出现沉淀。滴定后继续搅拌15min，然后在冰箱内冷却到4℃过滤，沉淀用冷水洗条3次。然后称取0.043g茚三酮和0.007g还原茚三酮，用50ml乙二醇甲醚溶解。 2. 1%抗坏血酸溶液的制备：精密称取1克抗坏血酸固体放到100ml的容量瓶中水稀释刻度。 3．4%氢氧化钠溶液的配制：称取氢氧化钠4g放到100ml的容量瓶中水稀释至刻度。 4．pH5的柠檬酸溶液的制备：精密称取2g柠檬酸稀释然后加0.1mol/l氢氧化钠溶液至pH=5[8]。 5．6mol/L盐酸的制备：100容量瓶中放入50ml盐酸再加入50ml水稀释刻度。 6．60%乙醇的制备：量取63ml乙醇放入100ml容量瓶中水稀释至刻度。 7. 丙氨酸的配制：取0.032g丙氨酸放入100ml容量瓶中水稀释至刻度。1.3 实验方法 1.3.1 最大吸收波长 精密量取浓度为0.32mg/ml丙氨酸标准溶液0.0ml，0.1ml分别装入25ml具塞试管中，加水使成1.0ml，加pH为5.0的柠檬酸缓冲溶液1.0ml，加1%抗坏血酸溶液0.1ml，茚三酮乙二醇甲醚试液1.0ml，摇均，放到沸水中加热3分钟，取出，放冷至室温，加60%乙醇3ml，水稀释至刻度，摇均。用分光光度计，在460-650nm波长处扫描得吸收曲线，并确定最大吸收峰的波长，以此为测（结果见表-2图-1） 1.3.2标准曲线的绘制 精密量取浓度为0.32mg/ml丙氨酸标准溶液0.0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5，0.6，0.7ml分别装入25ml具塞试管中，加水使成1