2008-2017全国生物竞赛生物化学真题 PPT.ppt

非糖物质进入糖异生的途径 ⑴ 糖异生的原料转变成糖代谢的中间产物 生糖氨基酸 除Phe,Tyr,Leu,,lys,Trp外 α-酮酸 -NH2 甘油 α-磷酸甘油 磷酸二羟丙酮 乳酸 丙酮酸 2H ⑵ 上述糖代谢中间代谢产物进入糖异生途径，异生为葡萄糖或糖原 注意：乙酰CoA不能是糖异生的前体，它不能转化为丙酮酸，因为丙酮酸脱氢酶是不可逆的 脂肪酸－β－氧化产生的乙酰辅酶A，在肌肉中进入三羧酸循环，在肝肾细胞中还有另一条去路，就是生成乙酰乙酸、β-羟丁酸、丙酮，这三者总称为酮体。 代谢定位： 生成：肝细胞线粒体 利用：肝外组织（心、肾、脑、骨骼肌等）线粒体 肝脏生成，肝外利用 75、酮体 2009年 非极性中性氨基酸 N H CH3 2 CH2 极性中性氨基酸 Cys， 酸性氨基酸 碱性氨基酸 H2N-C-NH— = NH 氨基酸小结 酸性氨基酸：天门冬氨酸Asp、谷氨酸Glu 碱性氨基酸：精氨酸Arg、赖氨酸Lys、组氨酸His 芳香族的（含苯环的）：苯丙氨酸Phe、酪氨酸Tyr、色氨酸Trp 36、蛋白质的变性与复性 变性剂 蛋白质空间构象破坏 生物学活性丧失 理化性质改变 加热、酸碱、有机溶剂、 尿素、盐酸胍、去污剂 易水解 易沉淀 蛋白质非共价键和二硫键破坏， 不涉及肽键 复性：去除变性因素，蛋白质恢复空间构象 与生物学活性的过程。 3.蛋白质的变性与复性 核糖核酸酶的变性与复性示意图 8M尿素或 β-巯基乙醇 透析 某些蛋白质在发生热变性后，松散的多肽链相互缠绕在一起，变成固体状态，称为蛋白质的凝固（coagulation）。 36、相关概念 透析：用透析袋（半透膜）把大分子和小分子分开的 方法。 离心：利用物质的大小、密度等方面的差异，用旋转所产生背向旋转轴方向的离心运动力使颗粒或溶质发生沉降而将其分离、浓缩、提纯和鉴定的一种方法。 盐析：高浓度中性盐使蛋白质从溶液中析出沉淀的方法（原理：破坏水化膜、中和电荷） 电泳：在电场中，带电颗粒向着与其带相反电荷的电极移动，这种现象称电泳 40、RNA介导的基因沉默 病毒基因、人工转入基因等外源性基因随机整合到宿主细胞基因组内，并利用宿主细胞进行转录时，常产生一些dsRNA。宿主细胞对这些dsRNA迅即产生反应， ? 40、RNA介导的基因沉默 其胞质中的核酸内切酶Dicer将dsRNA切割成多个具有特定长度和结构的小片段RNA（大约21～23 bp），即siRNA。siRNA在细胞内RNA解旋酶的作用下解链成正义链和反义链，继之由反义siRNA再与体内一些酶（包括内切酶、外切酶、解旋酶等）结合形成RNA诱导的沉默复合物（RNA-induced silencing complex，RISC)。RISC与外源性基因表达的mRNA的同源区进行特异性结合，RISC具有核酸酶的功能，在结合部位切割mRNA，切割位点即是与siRNA中反义链互补结合的两端。被切割后的断裂mRNA随即降解，从而诱发宿主细胞针对这些mRNA的降解反应。 siRNA不仅能引导RISC切割同源单链mRNA，而且可作为引物与靶RNA结合并在RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase，RdRP）作用下合成更多新的dsRNA，新合成的dsRNA再由Dicer切割产生大量的次级siRNA，从而使RNAi的作用进一步放大，最终将靶mRNA完全降解。 40、RNA介导的基因沉默 RNAi发生于除原核生物以外的所有真核生物细胞内。需要说明的是，由于dsRNA抑制基因表达具有潜在高效性，任何导致正常机体dsRNA形成的情况都会引起不需要的相应基因沉寂。所以正常机体内各种基因有效表达有一套严密防止dsRNA形成的机制。 40、RNA介导的基因沉默 RNAi具有的特征 　　①RNAi是转录后水平的基因沉默机制； 　　②RNAi具有很高的特异性，只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA； 　　③RNAi抑制基因表达具有很高的效率； 　　④RNAi抑制基因表达的效应可以穿过细胞界限，在不同细胞间长距离传递和维持信号甚至传播至整个有机体以及可遗传等特点； 　　⑤dsRNA不得短于21个碱基，并且长链dsRNA也在细胞内被Dicer酶切割为21 bp左右的siRNA，并由siRNA来介导mRNA切割。 　　⑥ATP依赖性： 40、RNA介导的基因沉默 104、动物细胞内主要RNA的种类及功能 2010年