果蝇唾腺染色体制备课件.pptVIP

果蝇唾腺染色体观察 果蝇（D. melanogaster 2n=8） 中文名：黑腹果蝇 果蝇 （Drosophila melanogaster 2n=8） 果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地如果园、菜市场等地区内皆可见其踪迹（除了南北极外）。目前至少有1000个以上的果蝇种被发现，大部分的种以腐烂的水果或植物为食，少部分则只取用真菌，树汁或花粉。 果蝇的优点： 生活史短，20～25℃ 12～15d完成一个世代。 繁殖率高，一对果蝇可产卵400～500只。 饲养方便。 染色体数目少。 突变率高且形态容易辨认。 一、实验目的 1、掌握果蝇幼虫唾腺分离技术，唾腺染色体制片方法。 2、观察果蝇唾腺染色体的形态及特征。 二、实验原理 唾腺染色体的发现： 1881年，意大利的细胞学家巴尔比尼（Balbiani)在双翅目昆虫摇蚊幼虫的唾腺细胞间期核中发现了一种巨大的染色体，由于存在于唾腺细胞中，所以又称为唾腺染色体。1933年，美国学者贝恩特（Painter）等又在果蝇核其它双翅目昆虫的幼虫唾腺细胞间期核中发现了巨大染色体。这种染色体宽约5μm，长400μm，相当于普通染色体的100～150倍，因而又称为巨大染色体。 形成原因：核内有丝分裂（endomitosis）。即染色体DNA多次复制，但着丝粒和染色单体未分裂分离。 果蝇幼虫唾腺染色体的主要特点 ?染色中心：由染色体的着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚在一起形成 ?特有的体细胞联会：由染色中心伸出6条配对的染色体臂（X、2L、2R、3L、3R、4） ?染色体在染色后呈现出横纹，其数目、宽窄、位置及排序具有种的特异性 三、实验用品 材料：黑腹果蝇三龄幼虫 器材：显微镜、载玻片、盖玻片、解剖针 药品：0.7%生理盐水 1M盐酸 1%改良的苯酚品红 四、实验操作流程1、挑取三龄幼虫 将生长良好、形体肥大的三龄幼虫放在加有一滴低渗液或生理盐水载玻片上。 2、熟悉幼虫结构 在解剖镜下检查，分清幼虫的头尾。幼虫具一钝尾和带黑色口器的尖头端。 3、拖出腺体 在解剖镜下用两支解剖针，一针压住身体前1/3处，另一针压住头端，平稳快拉，唾腺随之拖出。 4、剥离腺体 剥离腺体旁的消化道和脂肪体，仅让腺体留下。注意滴加生理盐水或低渗液防止干燥。 5、解离 用1M盐酸水解腺体5～10min，用滤纸条吸干盐酸溶液，再滴加生理盐水或低渗液清洗，重复3～4次。 洗净残留的盐酸，以免影响染色效果。 6、染色 滴一滴醋酸洋红或改良的苯酚品红，染色10min。 7、压片 染色后，盖上盖玻片，用滤纸吸去多余染液，再用大拇指压片。 五、实验结果与分析 绘制观察到的果蝇唾腺染色体图像。 总结与分析 果蝇染色体数为2n=8，其中第II、第III染色体为中部着丝粒染色体，第IV和第I（X染色体）染色体为端着丝粒染色体。唾腺染色体形成时，着丝粒和近着丝粒的异染色质区聚集形成一染色中心，所以在显微镜下可见从染色体中心处伸出6条配对的染色体臂，其中5条为长臂，1条为紧靠染色中心的很短的臂。 二、实验原理 果蝇唾腺染色体是处于体细胞同源染色体的配对状态，由于多次复制而不分开，因而形成具有1000～4000根染色体丝的巨大染色体，又称为多线染色体。 六、注意事项： （1）要求培养的三龄幼虫要肥大：需在培养基中加入较多的糖和酵母粉; （2）正确识别果蝇唾腺：根据唾腺存在的部位（身体前1/3处）、形态（囊状）、色差（半透明）等特点进行识别； （3）压片时，切勿搓动盖玻片。 * * 果蝇属节肢动物门、昆虫纲、双翅目、果蝇科、果蝇属。 8、镜检观察