章核苷酸与核酸课件.pptVIP

相互间吸引力最大的碱基对 1952年哥伦比亚大学教授查伽夫访问康桥，来到卡文迪什实验室。克里克多年后记述了这次会见：“起初，我们谈了许多有关蛋白质的问题，后来我问及核酸研究现状，顿了一下说：‘一句话说完，就是1:1。’我又问1:1是什么意思，他说：‘文章已经发表了。’毫无疑问，我漏读了查伽夫的重要文章，感到茫然若失。他又补充了一句：‘这是电效应的缘故。’我突然闪现了一个念头，‘天哪！1:1不就是互补配对吗？’他还讲了些什么，我一点也没有听见。告别了查伽夫，我立刻去找格里菲斯，请他再告诉我，理论计算表明哪两种碱基间吸引力最大。我转而去查阅查伽夫的文章，顿时惊呆了：格里菲斯算出来的碱基对A配T、G配C，正是查伽夫实验中克分子量呈现1:1比例的碱基对。”这就是著名的查伽夫当量定律，即分子数A＝T、G＝C。 Chargaff定律及DNA纤维X射线衍射分析→Waston-Crick模型 Waston Crick 发表在nature 上的文章 见人人之所见，思人人所未思 DNA半晶体X射线衍射——更精确的结构信息 Waston-Crick模型：一周螺旋10bp，核苷酸间夹角36度——DNA结构的平均特征 Dickerson：脱氧核糖核苷酸十二聚体X射线衍射→一周螺旋平均10.4bp，核苷酸间夹角28-42度；碱基对非共平面 碱基对的螺旋桨扭曲 Dickerson：螺旋桨扭曲 ——提高碱基堆积力 （2）特殊的二级结构 回文结构（palindromic structure）也称反向重复（inverted repeats）： （ 落鹤岛上岛落鹤，垂柳岸边岸柳垂） 链内互补 发夹形和十字形结构 镜象重复（mirror repeat） H-DNA——三螺旋DNA Hoogsteen碱基配对 三链DNA的碱基配对形式 双链DNA的碱基配对形式 DNA结构变化的意义 复制、转录、重组——起始、调节位点 3. DNA的三级结构 DNA的三级结构是指DNA分子（双螺旋）通过扭曲和折叠所形成的特定构象。包括不同二级结构单元间的相互作用、单链与二级结构单元间的相互作用以及DNA的拓扑特征。超螺旋结构是三级结构的一种。 * * D/L构型：糖分子中离羰基碳最远的手性碳原子的构型 * 1928年，英国科学家格里菲思（F.Griffith，1877—1941）用肺炎双球菌在小鼠身上进行转化实验。当时，他用了两种不同类型的肺炎双球茵。一种叫R型细菌，它的菌落粗糙，菌体无多糖类的英膜，是无毒性的球型菌；另一种叫S型细菌，它的菌落光滑，菌体有多糖类的英膜，是有毒性的球形茵，可以使人患肺炎或使小鼠患败血症。 致死小鼠体内分离出来肺炎双球菌全部是SⅢ型肺炎双球菌中，必然含有某种活性物质，促成了RⅡ型细菌的转变。但这种 活性物质是什么呢限于当时的科学水平， 研究者并未了解。 16年以后，阿委瑞（Avery，O．T．1944）和他的合作者，重复了格里费斯的试验，获得了相同的结果，并进一步对使无毒肺炎双球菌变为有毒肺炎双球菌的转化物质进行了分离和化学鉴定。他们把从SⅢ型细菌中抽取的物质与活的RⅡ型细菌混合在一起，在离体（试管里）培养的条件下，也成功地使少数RⅡ型细菌定向转化为SⅢ型细菌。而且将这种细菌分离出来并使其生长繁殖，它们的后代不但能继续保存具有荚膜及毒性的特性，而且它们的提取物质和其亲代一样，也具有使RⅡ型细菌转化成为SⅢ型细菌的能力（图7—2）。这证实了从S型细菌的提取物中有一种化学物质能引起细菌类型的转变。这种物质称为转化因素。 这种转化物质是什么呢？这种物质用蛋白酶，多糖酶和核糖核酸酶来处理，都未能使其活性受到影响，它只能为DNA酶所破坏，从而确认导致转化的物质就是DNA，也即DNA是遗传物质。 到1949年，用连续提纯的方法把DNA中的蛋白质污染降低到0.02％以下，这种提纯的DNA不仅对转化始终有效，而且DNA的纯度越高，转化的频率也越高。 * 噬菌体侵染细菌的过程：（1）用尾丝吸附在细菌表面；（2）把DNA注入细菌细胞中；（3）利用细菌的化学成分合成出噬菌体自身的DNA和蛋白质；（4）组装出很多个与亲代一模一样的子代噬菌体；（5）子代噬菌由于细菌的解体而被释放出来。　 美国冷泉港卡内基遗传学实验室科学家Hershey和他的学生Chase在1952年从事噬菌体侵染细菌的实验。噬菌体专门寄生在细菌体内。它的头、尾外部都有由蛋白质组成的外壳，头内主要是DNA。噬菌体侵染细菌的过程可以分为以下5个步骤：①噬菌体用尾部的末端（基片、尾丝）吸附在细菌表面；②噬菌体通过尾轴把DNA全部注入细菌细胞内，噬菌体的蛋白质外壳则留在细胞外面；③噬菌体的DNA一旦进入细菌体内，它就能利用细菌的生命过程合成噬菌体自身的DNA和蛋白