沉水植物轮叶狐尾藻与微生物联合抑藻效应及机理研究-生态学专业论文.docx

本论文经答辩委员会全体委员审查 ，确认符合安徽师范大学 硕士学位论文质量要求。 答辩委员会签名 : 主席 :(工作单位、职称 ) 委员 : 导师 : 学 位 论 文 独 创 性 声 明 本 人 声 明 所 呈 交 的 学 位 论 文 是 本 人 在 导 师 指 导 下 进 行 的 研 究 工 作 及 取 得 的 研 究 成 果 ， 与 我 一 同 工 作 的 同 志 对 本 研 究 所 做 的 任 何 贡 献 均 已 在 论 文 中 作 了 明 确 的 说 明 并 表 示 谢 意 ， 除 了 文 中 特 别 加 以 标 注 和 致 谢 的 地 方 外 ， 论 文 中 不 包 含 其 他 人 已 经 发 表 或 撰 写 过 的 研 究 成 果 。 学位论文作者签名： 签字日期： 年 月 日 学位论文版权使用授权书 本 学 位 论 文 作 者 完 全 了 解 安 徽 师 范 大 学 有 关 保 留 、使 用 学 位 论 文 的 规 定 ：学 校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查 阅 和 借 阅 。本 人 授 权 安 徽 师 范 大 学 可 以 将 学 位 论 文 的 全 部 或 部 分 内 容 编 入 有 关 数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。保 密 的 学 位 论 文 在 解 密 后 适 用 本 授 权 书 。 学位论文作者签名： 导师签名： 签字日期： 年 月 日 签字日期： 年 月 日 学 位 论 文 作 者 获 学 位 后 去 向 ： 工 作 单 位 ： 电 话 ： 通 讯 地 址 ： 邮 编 ： 沉水植物轮叶狐尾藻与微生物联合抑藻效 应及机理研究 摘 要 随着经济全球化的蓬勃发展，世界各地的工业化进程不断加快，由 此带来的环境问题日益突出。其中由于水体中营养盐含量严重超标，富 营养化程度加剧，导致蓝藻水华频发。在预防和治理水华的各种研究方 法中，高等水生植物的化感抑藻作用以及微生物的溶藻作用成为目前研 究的热点课题。 轮叶狐尾藻（Myriophyllum verticillatum L.）是常见的水生沉水植物， 在全球广泛分布。大量研究表明其同属的穗花狐尾藻(Myriophyllum spicatum L.)具有良好的化感抑藻作用，那么轮叶狐尾藻是否也可以抑制蓝藻的生 长？而且，轮叶狐尾藻生长在复杂的水体环境中，它的化感作用与水体 中大量存在的微生物是否存在关联？为此，本研究创新性地首次探讨了 轮 叶 狐 尾 藻 与 水 体 微 生 物 联 合 对 水 华 蓝 藻 铜 绿 微 囊 藻 （ Microcystis aeruginosa）的抑制效应，取得以下结果： 1. 轮叶狐尾藻与微生物联合抑藻效应 轮叶狐尾藻（无菌）根、茎 浸提液的抑藻效果较差，明显低于轮叶狐尾藻（含菌）根、茎浸提液的 抑藻效能，p0.05。从轮叶狐尾藻根、周际分离出两种微生物经 16S rRNA 基因 分 析 鉴 定 分 别 为 假 单 胞 菌 属 （ Pseudomonas ）和不动杆菌属 （Acinetobacter）。有趣的是，两种微生物单独抑藻作用效果也不佳，但 与轮叶狐尾藻共培养后的种植水对铜绿微囊藻抑制作用明显增强，尤其 是假单胞菌属与轮叶狐尾藻具有非常显著的协同抑藻作用。 2. 轮叶狐尾藻与微生物联合抑藻的数学模型分析 根据抑藻效果， 建立了蓝藻生长的差分——微分方程以及藻密度关于时间的泛函偏微分 方程，该方程组可以较好地预测和计算不同时间节点上、不同环境条件 下的藻密度和半抑制浓度。 3. 轮叶狐尾藻与微生物共培后化感物质的分离鉴定 轮叶狐尾藻 分别与两种微生物共培养，然后分别以有机溶剂萃取其化感抑藻物质， 经大孔树脂纯化以及 GC-MS 分析表明，轮叶狐尾藻与微生物联合释放的 化感物质主要有双丙酮醇、2-硝基丙烷、二乙二醇、碳酸二烯丙酯、1， 2-二甲基乙酸丙酯等。 4. 轮叶狐尾藻与假单胞菌属联合抑藻的机理研究 轮叶狐尾藻与 假单胞菌属共培后，其浸提液作用于铜绿微囊藻，可使藻细胞外液中可 溶性蛋白（OD280）、可溶性核酸（OD260）和电导率增加，氧自由基（O2-.） 和丙二醛（MDA）产生量增多，超氧化物歧化酶（SOD）活性逐渐降低， 与同期对照组相比，变化均极显著，P0.01。 从 OLYMPUS 荧光显微镜对藻细胞形态观察结果看，植物浸提液对 藻细胞表现出明显地破坏作用；扫描电镜观察表明，随着浸提液浓度的 增加，细胞表面由光滑完整逐渐变为粗糙、粘连，周围出现大量絮状物， 直至细胞破裂溶解。 综上所述，高等水生植物与微生物联合可通过其协同作用显著增强 抑藻效能。因此，在实际应用时可通过有目的地添加专一微生物，从而 可大大减少单纯高等水生植物或微生