磁性纳米材料改性及固定化脂肪酶的分析-生物化学与分子生物学专业论文.docx

emulsion as mode substrate. A study is conducted on the optimum condition of enzymatic reaction to ensure the performance parameter of CRL. The result shows the optimum catalytic temperature is 45℃ and pH7.0. After catalyzing the hydrolysis substrate for 8 times, the remainder activity is 83.7%, with a good reusability. Under the condition of 4M urea concentration, the apparent enzyme activity of substrate reaches as high as 78.1%, which indicates a strong contravariance. Compared with free lipase, immobilized lipase optimal temperature increased by 5℃, the optimal pH increased by 0.5 unit, temperature and degeneration agent of urea tolerance got significantly improved, and it has high reusablity, which provide reference for future industrial application. KEY WORDS：magnetic，nano materials，immobilize，lipase II I I 主要英文缩写词表 Abbreviations 英文缩写 英文全称 中文名称 CRL Candida rugosa lipase 假丝酵母脂肪酶 APTES aminopropyltriethoxysilane γ-氨丙基三乙氧基硅烷 TEOS tetraethyl orthosilicate 正硅酸乙酯 HTEOS hexadecyltrimethoxysilane 十六烷基三甲氧基硅烷 GA glutaraldehyde 戊二醛 CS chitosan 壳聚糖 PVA polyvinyl alcohol 聚乙烯醇 TEM transmission Electron Microscope 投射电子显微镜 FT-IR fourier transform infrared spectrometer 傅里叶变换红外光谱仪 XRD X-ray diffraction X-射线衍射仪 VSM vibrating specimen magnetometer 振动样品磁强计 MNC Magnetic nano-amino carrier 磁性纳米氨基载体 III 1 1 前言 磁性纳米材料改性及固定化脂肪酶的研究 磁性纳米材料改性及固定化脂肪酶的研究 PAGE PAGE 13 PAGE PAGE 10 1 前言 酶（enzyme）是由生物活细胞分泌产生的一类具有催化功能的蛋白质。酶作为生 物催化剂，在常温、常压和中性 pH 下即可进行催化反应，而且催化效率非常高，同时 对作用底物具有高度的选择专一性。另外，酶还能催化一些化学催化剂较难进行的反 应，副反应产物少，因此酶在工业上有较为广泛的应用。几乎所有酶的化学本质都是 蛋白质。在生产中，工业酶制剂的使用一般较为粗放，大都一次投放使用，无法回 收，造成浪费，而且增加了下游产物的分离和纯化的难度。另一方面，酶又极其脆 弱，高温、酸、碱以及有机试剂都可导致酶变性失活。研究表明，酶被固定化后，在 催化作用中可以反复利用，减少酶耗量，降低成本，同时在产物分离纯化上更加便 利。因此，从上世纪 70 年代以来，酶的固定化研究已广泛重视和深入研究，一些固定 化酶也已用于生产实践。 1.1 脂肪酶概述 脂肪酶（lipase E.C.3.1.1.3）又称甘油三酯水解酶（acylglycerol hydrolases），普遍 存在于各种生物中[1-4]，其中工业生产中应用的脂肪酶制剂大都是由微生物发酵所产生 的。微生物中能够发酵生产脂肪酶的种类很多，据统计共有 65 个属，这些微生物种类 中细菌占 28 个属，酵母菌占 10 个属，放线菌占 4 个属，还有其他 23 个属的真菌[5]。 脂肪酶的天然作用底物是长链脂肪酸酯，不同于其他大部分酶，它能够在油水界面上 很好的进行催