放线菌发酵液对油菜菌核病的生物防治研究-植物病理学专业论文.docx

I 11111111111111111111111111111111111111111111111111 Y18011 丁 4 论文独创性声明 本人郑重声明:所里交的学位论文是我个人在导师指导下进行研究工作所取得的 成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，学位论文中不包含其他个 人或集体巳经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得四川农业大学或其它教育机 构的学位或证书所使用过的材料。与我…同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已 在论文中作了明确的说明并表示了谢意。 ι//何年h ι / /何 年 hw 7LV 关于论文使用授权的声明 本人完全了解四川农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即:学校有权保留井向国家布 关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描 等复制手段保存、汇编学位论文。问意四川农业大学可以用不间方式在不同媒体上发表、传播学 位论文的全部或部分内容。 研究生签名扮。毡 / 导师签名: .，..-别 í7AJ {?年-{fi 01日 / 年月日 / / 放线菌发酵液对油菜菌核病的生物防治研究 研究生:姚佳(植物病理学〉 导师t 黄云教授 中文摘要 菌核病是油菜上的重要病害之一，具士传和气传病害的特点。本实验通过分离白菜、茶树、 红豆和银沓的根际土壤和植物内生放战菌，寻找对油菜菌核病有高抗性的放线酶菌株。同时，研 究描抗放钱菌对油莱茵的抗性影响，检测放钱商在土壤、抽菜叶面以及袖莱茵的定殖情况。对拮 抗放线菌进行室内盆栽、离体叶片和大回防效等的实验研究，为开发生防前剂提供理论依据。主 要研究结果有: 1. 具生防潜能放线菌菌株的分离和筛选 从白菜、茶树、红豆和银杏的根际土壤内和植物内共分离到了 165 株放线菌，对油菜商核病 有拮抗作用的有 25 株。从中逃出拮抗作用较强的 4 株放线菌，分别为植物内生放线菌 YJ1 (分 离白银杏枝内)和来自白菜、红豆树、茶树根际土壤的 BC32 、HD8 、CS40 YJ1、 BC32 、HD8 和 CS4 的拮抗带宽为 llmm 、llmm 、8mm 和 10mm，其抑商率分别为73.5%、84.4%、 58.1%和 50.7% 。高浓度的放线菌无商发酵破能抑制菌核和子囊炮子的萌发。其中， BC32 对子囊炮子萌发 的抑制率达 98.3%， YJ1也有 96.6% 。但放钱菌无商滤液经稀释以后，其抑菌放果会降低。 2. 放绒酶酶株的鉴定 通过形态、培养特征、生理生化和 168 rDNA测序，将YJ1鉴定为背胆链霉菌S伊eptomycesfelleus ， HD8鉴定为淡紫灰链霉商丘 lσvendulae ，其同源性分别为 99.5%和98.4%。将BC32和CS4初步鉴定 为链霉菌属8tr向l ptomyces 的白础类群和褐色类群。 3. 拮抗放绒菌能提高袖莱茵的酶活性 拮抗放绒菌能显著提高油菜内 SOD、PPO和POD的酶活性。这3种酶之间无明显数最关系， 不同处理对SOD、PPO和POD的酶活性的影响不同。在检测时， PPO活性较低，这可能与油菜内 本来PPO的含量就低有关系。其中， YJl和CS4对泊莱茵的酶活性的提高较多。 4. 放绒菌的防病效果 在室内试脆中，放线菌用菌液灌根成搜棍，徐抹油莱茵叶片或喷施离体叶片，都能显著控制 病斑扩展。其中， YJ1和BC32对油菜菌核病酶的防病效果较好。 HD8 的防病效果相对较弱，与定 殖和诱导抗性实验结果…致。离体叶片试验表明，放线菌除了有防病作用外，还有附病作用。 YJ1 在捕体油菜上表现的对茎的防泊效果在 4个放线菌中最楚，其喷金株后，在叶上的平均病斑妖只 II II 有9.2mm.BC32对叶的抑制作用最好，在前期对;在上病斑的抑制作用较强，但在后期就有所下降。 但在防治试验中， YJ1的防治效果明显高于其它阔的田间防效。 S. 放绒酶的起殖 HD8 和 CS4 都能在士壤内短期定殖，在第 40d 时，数最级分别为 107和 104，而且数最还有 下降的趋势。而 Yll 和 BC32 在土壤中的数最一直在增长， 40d 时还有大量生长的越势。放钱菌 在叶上的定殖较弱， HD8 和 CS4 在接种 6--9d 以后，在叶上不自良检测到标记菌。 BC32 和 YJ1在 叶上存在的时间较快，但数量也是很快在减少。所有放线商都能在袖莱茵内定殖，在油菜内的数 量都是先增加厨减少。其中，在根部的定殖数量最多。模根处理以后， Yll 在第 45d 的时根内数 量达 2.312x l0scfu/g。其余3 种放线菌在油菜内的定殖数量都是根〉茎〉叶，根内的标记放线菌 数量大于鉴内 10 102 个数量级。使用灌根和漫根的方法都能使放钱