非病毒载体介导的热诱导基因治疗-微生物与生化药学专业论文.docxVIP

上海交通大学硕士学位论文 上海交通大学硕士学位论文 PAGE PAGE 1 非病毒载体介导的热诱导基因治疗 摘 要 基因治疗Gene therapy是将外源性遗传物质输送到靶细胞 以改善由于 基因缺陷和变异引起的疾病 达到治疗目的 基因治疗 中的关键问题主要是基因的输送和基因进入细胞后的表达调控 目 前 在基因输送方面 主要分为病毒载体和非病毒载体两大类 在 调控基因的表达上 大多在基因的转录水平上进行调控 利用一些 受物理或化学因素诱导的启动子元件构建出受这些理化因素诱导的 真核表达载体 从而实现对基因表达的调控 我们利用受热诱导起动的 hsp70B 启动子和荧光素酶报道基因构 建出受热诱导的真核表达质粒 借助脂质体和电穿孔等非病毒基因 输送技术 热诱导表达质粒被导入到体外培养的细胞和动物体内 我们对细胞和体内的热诱导基因表达做了研究 比较了不同加热温 度下在体基因表达的差异 尝试了将热诱导作为基因表达 开关 的可能性 同时 我们自行搭建了应用于在体加热的一套超声加热 系统 在体内基因治疗上 实现了基因表达在时间上和空间上的调 控 对于热诱导的基因表达 我们主要研究了加热诱导后 基因表 达随时间变化的过程 在细胞实验中 基因表达在热诱导后 8 小时 内达到最大值 基因诱导倍数在 100 倍以上 之后三天内便可以降 至较低的水平 体内实验也与此相似 在加热