大豆异黄酮对大鼠全脑缺血再灌注后神经元的保护作用及其机理探讨-病理学与病理生理学专业论文.docx

大豆异黄酮对大鼠全脑缺血再灌注后神经元的 保护作用及其机理探讨 中文摘要 目的：1.观察大豆异黄酮（soybean isoflavone,SI）对大鼠全脑缺血再灌注后神经 元的保护作用及其机理探讨。 方法：60 只健康成年雄性 Sprague-Dawley 大鼠，随机分为 3 组：假手术组（Sham group，n=20），缺血再灌组(I/R group，n=20)，大豆异黄酮预处理组（SI group， n=20），大豆异黄酮预处理组给予 SI 灌胃，按剂量 120 mg/kg，每天一次，灌胃 21 天，其他两组用等体积的 0.9%生理盐水连续灌胃 21 天，均于第 22 天进行手 术。制作全脑缺血再灌注损伤模型，即夹闭双侧颈总动脉及基底动脉 1h, 以脑电 图几秒内变为一条直线作为全脑缺血模型成功的标志。缺血 1 h 后松夹，再灌注 1h；假手术组仅手术(暴露和分离血管)不予缺血；各组实验的全过程中动态监测 脑电图变化。光镜下观察各组大脑皮层组织病理形态学变化。用半定量 RT-PCR 法检测皮层脑组织中 CytochromeC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA 表达。免疫组织化学法测定脑组织中 CytochromeC 蛋白、Caspase-9 蛋白、 Caspase-3 蛋白的表达。 结果：1、在光镜下观察大脑皮质区的病理形态学变化：假手术组: 神经元数量 丰富，突起明显，结构完整，核膜清晰，核仁大; 模型组: 损伤严重，脑组织排 列紊乱,细胞正常结构消失，可见神经元变性，大量片状坏死伴严重水肿,核固缩, 呈强嗜碱性,染色质浓缩,伴神经胶质细胞增生;SI 组: 损伤减轻，水肿程度减轻， 在一定程度上神经元结构和数量有所恢复。 2、半定量 RT-PCR 检测结果显示：假手术组脑组织 CytochromeC mRNA、Caspase-9 mRNA、Caspase-3 mRNA 表达较低；缺血再灌组的表达显著增加（P0.05）； 大豆异黄酮预处理组的表达较再灌组相比明显降低（P0.05）。 3、免疫组化检测结果显示：假手术组细胞浆内仅见少量的 CytochromeC 蛋白、 Caspase-9 蛋白、Caspase-3 蛋白表达;与假手术组比较，再灌组细胞浆内 CytochromeC 蛋白、Caspase-9 蛋白、Caspase-3 蛋白表达明显增高（P0.05）。 与再灌组相比，大豆异黄酮组胞浆内 CytochromeC 蛋白、Caspase-9 蛋白、Caspase-3 蛋白表达明显降低（P0.05）。 结论：1、SI对大鼠全脑缺血再灌后神经元的凋亡有抑制作用。 2、SI可能通过抑制线粒体通透性转换孔（mitochondrial permeability transition pore , MPTP）释放CytochromeC等促凋亡因子，抑制凋亡蛋白酶的激活，从而抑制细胞 凋亡。 关键词：脑缺血再灌注损伤；凋亡；大豆异黄酮；CytochromeC；Caspase-9； Caspase-3 ； To explore the protective effects and mechanisms of soybean isoflavone on neurons in rats after global cerebral ischemia/reperfusion Abstract Objective: To study the protective effects and mechanisms of soybean isoflavone (SI) on neurons in rats after global cerebral ischemia/ reperfusion (I/R) injury. Methods: Sixty adult healthy male Sprague-Dawley rats were randomly assigned into three groups : sham group(Sham group ,n=20), ischemia/ reperfusion group (I/R group ,n=20), soybean isoflavone group (SI group,n=20).The SI pretreating group was given intragastric administration of SI at the dosage of 120 mg/kg once daily for 21days,while the other groups were insteaded by normal salt solution of equal