植物生理学试验讲义-天津中医药大学.PDF

植物生理学实验讲义 天津中医药大学中药学院生药教研室 目 录 目 录 I 实验一 植物材料的无土培养及缺素症状观察（3 学时）1 实验二 植物组织水势的测定（小液流法）（3 学时）2 实验三 缺磷、缺铁对植物叶片中叶绿素含量影响（叶绿体色素的提取、分离及 定量测定）及光合速率的测定（3 学时）3 实验四：缺素培养对叶片质膜透性及过氧化物酶活性的影响（电导率的测定愈 创木酚法测定POD 酶活性）（3 学时）5 Part Ⅰ缺素培养对叶片过氧化物酶活性的影响5 Part Ⅱ 缺素培养对叶片质膜透性的影响6 实验五：设计性实验：逆境胁迫下植物的适应机制研究（6 学时）7 Part Ⅰ蒽酮法测定可溶性糖7 Part Ⅱ植物体内可溶性蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝法）9 Part Ⅲ 植物组织中丙二醛含量的测定 11 I 实验一 植物材料的无土培养及缺素症状观察 （3 学时） 【实验原理】 只要满足植物正常生长发育的要求(光、温、水、气、必需元素) ， 植物可以在水中或砂中生长。把必需矿质元素配制成培养液培养植物称溶液培 养，而把培养液加于洁净的石英砂中培养植物则称砂基培养。由于培养液中元素 的种类和数量可以人为控制，因此当要了解某种元素是否为植物必需时，只要有 意识地配制缺乏该种元素的培养液，根据植物在该培养液中所表现出来的症状， 便可了解该元素的作用以及对植物生长发育的必要性。 【器材与试剂】 器材:，贮液塑料桶 （10 个)，量筒，移液管，石英砂或蛭石适量，水培设备 4 个移液器，酸度计，电子天平，数码相机。 试剂：硝酸钙，硝酸钾，硫酸镁，磷酸二氢钾，硝酸钠，氯化镁，硫酸钠，磷 酸二氢钠，氯化钙，氯化钾，EDTA-Na ，FeSO ，CuSO ，HBO ，KI ，MnCl ， 2 4 4 3 2 ZnCl ，Na MoO 。HCl ，NaOH ，Na ClO 或CaClO 以上试剂均需分析纯。 2 2 4 2 4 4 【方法与步骤】 1.准备工作 1）幼苗准备:实验用种子用漂白粉溶液灭菌半小时，用灭菌水洗几次，然后 放在干净的湿石英砂中发芽，加以蒸馏水培养长至一定高度(5cm 左右) 。选择生 长势相同的植株进行实验。 2 ）培养液准备:按hogland 营养液配方配制对照和各种缺素营养液。 配制时先在容器中放蒸馏水或无离子水800ml 左右，然后加入各种贮备液。 每种贮备液均应缓慢加入，充分搅匀，然后再加下一种贮备液，待全部加好后再 用pH 计或pH 试纸检查，并用1N HCl 或1N NaOH 将培养液调至适宜植物生长 的pH 值(如蕃茄pH5.5 - 6.0，小麦6.0-7.0)，然后加水至1 升。 3 ）容器准备:分别向水培设备中加入对照和各种缺素营养液, 在孔中放入萌芽 的种子,盒体上要注标记，如: N、 P 、 K 等。 2.培养和管理:置温室或塑料大棚或室内光照充足温暖处培养。 培养期注意： 1）经常加蒸馏水或无离子水，以保持罐内培养液的体积，注意调整pH 值， 1 使所培养植株生长在合适的环境中。 2 ）定期更换培养液。 3 ）每2 天记录一次植株生长发育情况(株高、茎粗、根长、叶片大小和颜色) ， 实验结束时，即各处理的差异明显时，对植物进行彩色照相，并取部分苗子进行 考苗，称取植株鲜重，烘干重，进行植株成分与含量分析。 实验二 植物组织水势的测定（小液流法） （3 学时） 【实验原理】将植物组织分别放在一系列浓度递增的溶液中，当找到某一浓度的 溶液与植物组织之间水分保持动态平衡时，则可认为此植物组织的水势等于该溶 液的水势。因溶液的浓度是已知的，可以根据公式算出其渗透压，取其负值，为 溶液的渗透势（ψs ），即代表植物的水势（ψw ），ψw=ψs -iCRT 。 【器材与试剂