番荔枝内酯单体squamocin对人肺癌细胞体外增殖和凋亡的影响-肿瘤学专业论文.docx

万方数据 万方数据 目 录 中英文缩略词表 1 中文摘要 2 英文摘要 4 引言 6 材料和方法 8 结果 20 讨论 32 结论 35 参考文献 36 致谢 39 综述 40 2 福建医科大学 福建医科大学 2009 级硕士研究生毕业论文 中英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文 AAs annonaceous acetogenins 番荔枝内酯 Bax BCL2 associated x-protein Bcl-2 相关 x 蛋白 Bcl-2 B-Cell lymphoma/leukemia-2 B 细胞淋巴瘤/白血 病-2 Caspase Cysteinyl aspartate specific protein 半胱氨酸天冬氨酸 特异性蛋白酶 DMSO Dimethyl sulfoxide 二甲基亚砜 FITC fluorescein isothiocyanate 异硫氰酸荧光素 IC50 MTT Half inhibitory concentration Thiazolyl blue tetrazolium brom- ide 半数抑制浓度 噻唑兰 NSCLC Non-Small Cell Lung Cancer 非小细胞肺癌 OD Optical density 光密度 PBS Phosphate buffer saline 磷酸盐缓冲液 PI Propidium iodide 碘化丙啶 PS Phosphatidylserine 磷脂酰丝氨酸 1 番荔枝内酯单体 squamocin 对人肺癌细胞 体外增殖和凋亡的影响 中文摘要 目的： 观察番荔枝内酯单体 squamocin 对人肺腺癌细胞 A549 和人肺鳞癌细胞 SK-MES-1 增殖的抑制作用及促凋亡作用；探讨 squamocin 促肿瘤细胞凋亡的机 制。 方法： 1．检测 squamocin 对人肺癌细胞体外增殖的影响：采用 MTT 法检测不同浓 度的 squamocin 干预 A549 细胞和 SK-MES-1 细胞 24、48、72h 后，各组细胞的 增殖情况，并计算各组细胞的增殖抑制率和样品的半数抑制浓度（IC50）。 2．检测 squamocin 对人肺癌细胞凋亡的影响：采用流式细胞仪技术检测 squamocin 干预 A549 细胞和 SK-MES-1 细胞 24、48、72h 后，各组细胞凋亡率 的变化。 3．检测 squamocin 干预后人肺癌细胞凋亡相关蛋白的表达情况：采用 Western blot 技术检测 squamocin 干预 A549 细胞 12、24、48h 后，各组细胞凋亡相关蛋 白 caspase-3、Bax、Bcl-2 表达的变化。 结果： 1．MTT 结果显示：squamocin 在体外对 A549 细胞的增殖具有抑制作用， 且抑制作用与浓度之间呈现剂量效应正相关，24、48、72h 的 IC50 分别约为 16.54μg/ml、9.28μg/ml、6.17μg/ml；squamocin 在体外对 SK-MES-1 细胞的体外 增殖具有一定的抑制作用，其抑制率随着自身浓度的升高有所增强，24、48、72h 的 IC50 分别约为 26.74μg/mL、20.21μg/mL、13.95μg/mL。 2．流式细胞仪检测结果显示：squamocin 在体外对 A549 细胞有促凋亡作用， 并且随着时间的延长，细胞的凋亡率增加，各实验组的 A549 细胞凋亡率之间及 与阴性 对照 组凋 亡率 的比 较有 显著 性差 异（P0.01）；squamocin 在 体外对 2 SK-MES-1 细胞有一定的促凋亡作用。 3．蛋白印迹结果显示：squamocin 干预后细胞凋亡相关蛋白 caspase-3、凋 亡诱导基因 Bax 的表达上调（P0.05），抑制细胞凋亡基因 Bcl-2 的表达则明显 下调（P0.05），差异有统计学意义。 结论： 1．squamocin 能较有效地抑制 A549 细胞和 SK-MES-1 细胞的增殖；其中， A549 细胞对 squamocin 的抑制作用较敏感，而 SK-MES-1 细胞对 squamocin 的 抑制作用不敏感； 2．squamocin 可能是通过促进肿瘤细胞凋亡来抑制肺癌细胞的增殖，其促凋 亡机制可能与促进凋亡基因蛋白 Bax 的表达，同时下调 Bcl-2 的表达，进而上调 caspase-3 的表达有关。 关键词： 肺癌 细胞凋亡 squamocin A549 SK-MES-1 3 Effect of a monomer squamocin of annonaceous acetogenin on proliferation an