纯钛表面微弧氧化结合胶原I对成骨细胞黏附增殖的影响-口腔修复学专业论文.docxVIP

2011 2011 届贵阳医学院硕士研究生毕业论文 PAGE PAGE 10 纯钛表面微弧氧化结合胶原 I 对成骨细胞黏附增殖的影响 专 业： 口腔修复学 研究生： 冉丹丹 导 师： 王 永 教授 张军梅 教授 [摘要] 目的：探讨微弧氧化技术（ Micro-arc Oxidation，MAO ）结合胶原 I 应 用于纯钛种植体表面处理的可行性。方法： 纯钛钛片经 MAO 处理后，分为三 组：对照组 (不做表面处理)，MAO 组，MAO 结合胶原 I 组（ MAO + I 组）， 将成骨细胞培养在各组钛片上，检测不同时间点上，各组钛片表面的细胞的增殖 情况及 ALP 活性。结果：培养早期（1、2 d ）测得的各组细胞密度没有明显区 别；培养 3 d 后，MAO + I 组的细胞密度明显高于 MAO 组和对照组（ P 0.05）， 在 ALP 活性检测中，在 3 d 和 6 d 两个时间点上，各组 ALP 活性大小依次为 MAO + I 组 MAO 组对照组。结论：微弧氧化结合胶原 I 处理的钛片可更有 效提高成骨细胞表面附着、增殖，且具有较高的 ALP 活性。 [关键词]：纯钛；成骨细胞； MAO；胶原 I 前言 种植体以其有效的支持、良好的咀嚼功能、舒适美观等诸多优点而广泛应用 于口腔临床。近十多年来，随着种植材料、种植体系的不断完善，外科种植和修 复技术的不断改进和提高，使种植义齿的应用范围逐渐扩大，为了适应临床需要， 对种植体的研究也成了近年来的研究热点[1]。 种植体种植成功的关键在于形成良好的种植体—骨结合界面，而成骨细胞 （ Osteoblasts ）是种植体—骨结合界面中的重要细胞组成部分[2]。成骨细胞首先 在种植体表面粘附，从而迁移、增殖和分化，其中，黏附是基础，对于形成良好 的骨结合界面至关重要[3]。同时，由成骨细胞分泌的胶原 I ，作为骨有机基质的 主要成分，通过整合素参与骨的构建，发挥细胞间的粘附作用，并参与成骨细胞 的发育、分化和活性调节[4]。种植体植入人体内,材料表面的物理化学性质及表面 结构会显著的影响细胞的黏附、伸展、生长、增殖以及细胞的活性和导向，因此， 提高种植体材料对成骨细胞的生物相容性是促进种植体—骨界面形成骨合，从而 提高种植义齿成功率的有效途径。 钛及钛合金由于具有良好的生物学性能和理想的力学性能，成为目前种植体 的主流材料，但其存在缺乏骨诱导作用，愈合时间长以及耐腐蚀性差等的缺点[5]。 为了改善钛及其钛合金的耐磨性、耐腐蚀性，并着重增大增强纯钛种植体表面的 生物活性，从而缩短钛—骨愈合时间,提高骨结合率,获得更加长久、可靠的愈合 效果，学者们尝试了多种改变钛表面的化学组成的方法来解决上述问题，近年来， 国内外开展的对纯钛种植体表面生物活性化处理的研究日益增多，方法有：物理、 化学、生物化学技术。结合各种方法的技术特点，取长补短，发挥各自优势，使 各种表面处理的方法相互结合应用，使之更易与骨发生结合，是目前的研究趋势 [6] 。 MAO （ Micro-arc Oxidation，MAO ）是一种对纯钛医用产品既简捷又行之 有效的表面化学处理方法。其可在金属表面原位生成厚达几百微米的微弧氧化膜 [7]。利用 MAO 技术处理纯钛种植体后可以得到表面疏松多孔，耐腐蚀[8]，富含 钙磷元素，并逐渐向与基体结合牢固的致密氧化层过渡，具有一定梯度分布的复 合二氧化钛膜表面[9]。研究表明经 MAO 处理的钛种植体表面对成骨细胞的生长 无毒性作用，有利于成骨细胞在其表面的生长、增殖[10]，且具有优于纯钛种植材 料的细胞生物相容性，从而促进种植体周围新生骨组织的生长，并缩短骨结合的 时间[11] 。 生物化学技术的表面处理方法，是将大分子蛋白质、酶或生长因子等有机高 分子物质引入金属基体表面[12]，使其具有更优良的生物活性，是一种更直接、更 有效的方法。材料植入体内后, 材料表面吸附不同蛋白而随机混合组成蛋白层, 为 黏附受体反应提供了许多不同的活性位, 造成细胞的许多受体反应同时被激活 [13-14] 。目前国内外研究者的目标是通过对材料表面进行修饰，能控制与材料表面 作用的细胞种类、数量, 以及控制材料与骨整合前期细胞生物信息。生物化学改 性中常用的方法—吸附法，其操作简单，对设备的要求低，只需在实验前将种植 材料浸入含有生物活性分子的溶液中一段时间，使其自然附着于种植体[15-17]。 本实验利用与骨组织形成过程中的决定性的有机成分—胶原 I ，将经过 MAO 处理的种植体表面吸附一层具有生物活性的物质，以诱导骨组织的形成，达 到生物化学的结合。以光滑钛片作为对照，对经过 MAO 和 MAO 结合胶原 I 处 理的钛片进行细胞学实验，评价其对新生 SD 大