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微核形成与细胞周期关系初步研究
摘要:微核是真核生物细胞中的一种异常结构,他是各种理化因子,如辐射、化学药物对分裂细胞作用的结果。一般认为微核是起源于落后染色体与丧失着丝粒的断片,在有丝分裂末期形成。但是另一些实验则表明间期细胞也可形成微核。本课题通过体外培养人的外周血淋巴细胞,在细胞周期的特定时期注射环磷酰胺20ug/ml,观察淋巴细胞微核形成与细胞周期的关系;实验结果证实了细胞周期的各时期都可能有微核形成。
关键词:环磷酰胺;淋巴细胞;细胞周期;微核 。
Micronucleus formation and cell cycle studies on the relationship between
Abstract:Micronucleus are the abnormal structure, which usually are the result of all kinds of physical-chemically factors such as radiation,chemical medicine to mitotic cells. Micronucleus is generally believed that behind the origin and loss of centromere chromosome fragment, formed in late mitosis. However, while some other experiments on cells that can form between the micronucleus.. This topic through in vitro of peripheral blood lymphocyte, In the cell cycle of specific period 20ug/ml cyclophosphamide injection, Observe lymphocyte micronucleus formation and the cell cycle. The results confirmed the cell cycle may have different periods micronucleus formation.
Key Words: Cyclophosphamide; Lymphocytes; Cell cycle Micronucleus.
前 言
本研究用γ-射线诱发人外周血淋巴细胞微核(MN),使用细胞周期控制、BrdU免疫荧光染色、松胞素B(CB)阻滞胞质分裂等技术,研究人淋巴细胞微核形成与细胞周期间的定量关系。结果:①G0期和G1期淋巴细胞照射组和对照组相比,微核率(MNF)和微核细胞率(MNCF)均无明显变化(P>0.05)。②S期和G2期淋巴细胞照射组和对照组相比,MNCF均明显增加(P<0.01)。(3)M期淋巴细胞照射组与对照组相比,MNF与MNCF分别增加90多倍和70多倍。结论:在人淋巴细胞周期中S期和G2期可形成MN,但M期是形成MN的主要阶段。
1选题背景
1.1课题来源
三门峡职业技术学院实验教学中心孟泉科老师。
1.2的相关研究
1.2.1微核的研究状况
微核是指位于细胞浆中独立于主核的核小体,其染色同主核,但比主核淡,其直径小于主核1/3,主要由外界损害因素(生物、物理、化学)作用细胞后,导致细胞染色体丢失或断裂,从而在胞浆中形成1个或数个小核[1]。因此,微核试验在对外来化合物(如药品、食品添加剂、农药、化妆品、环境污染物等)遗传毒性和职业暴露人群遗传损害监测和现场生态环境检测方面,在诊断和预防肝癌、食管癌、肺癌等恶性肿瘤方面得到了大量的应用。微核试验最大的优点是经济、简单、快速,而国内外大量的对比试验研究,比较一致的看法是该方法在敏感性、特异性和准确性方面,与经典的染色体畸变分析方法基本相当[2]。因而,特别适合作为大量化合物和现场人群初筛的实验方法。
微核试验创建于20世纪70年代中期(1973~1975)[3,4],目前许多国家和国际组织,已将其规定为新药、食品添加剂、农药、化妆品等毒理安全性评价的必做实验[5~8]。近年来,随着分子生物学技术的迅速发展和渗透到微核研究中,大大拓展了微核试验的检测和应用范围,已发展成为能同时检测染色体断裂、丢失、分裂延迟、分裂不平衡、基因扩增、不分离、DNA 损伤修复障碍、Hprt基因突变、凋亡、细胞分裂不平衡等多种遗传学终点的检测,因而近年来国际上有人提出了新微核试验概念[9],从而大大拓展了微核试验的应用范围[10,11]。当然,要实现一个实验多个遗传损害终点的检测,需要更多的新的技术手段配合,如FI
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